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申请/专利权人：海南省博鳌干细胞工程中心
申请日：2024-04-11
公开（公告）日：2024-06-25
公开（公告）号：CN118235757A
主分类号：A01N1/02
分类号：A01N1/02;C12N5/0775
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.25#公开
摘要：本发明公开了一种细胞存活率高的人脐带间充质干细胞的冻存方法，属于干细胞冻存技术领域，具体包括以下步骤：S1、选取一部分间充质干细胞，按照一定比例加入消化液继续消化，并观察间充质干细胞的状态，等待间充质干细胞变圆后立即加入细胞完全培养基停止消化。本发明中，通过添加营养添加物和冷冻保护剂，且控制与二甲基亚砜DMSO的比例，且通过摇匀注入后的冻存液，能够让二甲基亚砜DMSO、营养添加物和冷冻保护剂能够均匀混合，能够在冷冻过程中很好的保护细胞，避免细胞出现被冻坏的情况，能够避免细胞在冷冻过程中出现大面积结晶，避免细胞出现脱水的情况，不会对细胞膜造成损伤和破裂，且能够在复苏时更快的解冻。
主权项：1.一种细胞存活率高的人脐带间充质干细胞的冻存方法，其特征在于，具体包括以下步骤：S1、选取一部分间充质干细胞，按照一定比例加入消化液继续消化，并观察间充质干细胞的状态，等待间充质干细胞变圆后立即加入细胞完全培养基停止消化；S2、将间充质干细胞以及细胞完全培养基取出并放入离心式管内，将离心试管放入离心机中进行离心，离心后间充质干细胞沉淀在离心试管底部，上清液析出留滞在离心试管上部；S3、利用无菌吸管将上清液吸出，保留离心试管底部的间充质干细胞；S4、向离心试管内加入细胞悬液，然后继续颠倒混合，间充质干细胞会悬浮在细胞悬液中，方便对间充质干细胞的数量继续统计；S5、将间充质干细胞以及细胞悬液分装放入至多个冻存管内，然后向冻存管内加入冻存液，封闭冻存管并分别对多个冻存管做好标记；S6、利用医用棉条缠绕在冻存管外侧，然后使用医用纱布将棉条包裹在冻存管外部，随后将冻存管放入至冰箱内冷冻一段时间，最后将初步冷冻的冻存管放入至液氮中进行冷冻保存。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 海南省博鳌干细胞工程中心 一种细胞存活率高的人脐带间充质干细胞的冻存方法
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