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一种麻鸭鸭胚肝间充质干细胞的悬浮驯化方法及应用 

申请/专利权人:苏州双洳生物科技有限公司

申请日:2022-02-23

公开(公告)日:2024-06-28

公开(公告)号:CN114540292B

主分类号:C12N5/0775

分类号:C12N5/0775;C12N7/00;C12R1/93

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.28#授权;2022.06.14#实质审查的生效;2022.05.27#公开

摘要:本发明公开了一种麻鸭鸭胚肝间充质干细胞的悬浮驯化方法。本发明将分离培养的贴壁生长的鸭胚肝间充质干细胞经过低血清驯化、无血清悬浮驯化,得到稳定生长的悬浮无血清鸭肝间充质干细胞。通过实验确定了不同水禽病毒的接种工艺如接种比例、培养时间,确定收获标准等关键技术,实现不同病毒的适应性生长和提高相应病毒的含量,为水禽疫苗的研究奠定基础。本发明选用无血清培养基大大降低了细胞培养的成本,减少了由于使用血清可能造成的内源性病毒污染的几率;悬浮培养的细胞不需要胰酶消化,传代过程快,对细胞创伤更小,更容易做到扩大培养,批量收获;病毒通过接种悬浮细胞不仅实现了扩大培养,而且在一定程度上提高了病毒的效价。

主权项:1.一种悬浮无血清鸭胚肝间充质干细胞在接种水禽病毒中的应用,所述悬浮无血清鸭胚肝间充质干细胞经过麻鸭鸭胚肝间充质干细胞的悬浮驯化方法所得,所述的水禽病毒包括鸭甲型肝炎病毒DHAV1型和鸭坦布苏病病毒JS-F10株;所述麻鸭鸭胚肝间充质干细胞的悬浮驯化方法包括:步骤1:取贴壁生长的鸭胚肝间充质干细胞进行低血清驯化;所述低血清驯化为:在培养基中胎牛血清浓度≤10%的条件下,逐步降低培养基中胎牛血清的浓度进行传代培养;步骤2:低血清驯化所得的鸭胚肝间充质干细胞进行无血清悬浮驯化,得到悬浮无血清鸭胚肝间充质干细胞。

全文数据:

权利要求:

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