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一种生物酶法制备的三磷酸腺苷二钠及其应用 

申请/专利权人:美亚药业海安有限公司

申请日:2023-08-01

公开(公告)日:2024-06-25

公开(公告)号:CN116970666B

主分类号:C12P19/32

分类号:C12P19/32;C12N11/18;C12N9/12;C12N11/089;A61K31/7076;A61P21/00;A61P9/10;A61P9/00;A61P1/16;A61P25/00;A23L33/10

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.25#授权;2023.11.17#实质审查的生效;2023.10.31#公开

摘要:本发明涉及一种生物酶法制备三磷酸腺苷二钠的方法,其特征在于,包括如下步骤:1制备固定化酶;2在含有腺苷、六偏磷酸钠、磷酸二氢钠、硫酸镁的反应体系中,加入固定化酶,调节pH值为7.0‑7.5,37‑45℃下搅拌反应6‑10h;3反应液过滤回收固定化酶,过滤液经过离子交换树脂初步纯化获得粗ATP;4粗ATP溶解于水中,NaOH调节pH为2.5‑3.5,加入乙醇重结晶获得三磷酸腺苷二钠。本发明首次以C18键合改性硅胶为载体制备含有腺苷激酶EC2.7.1.20,AK、多聚磷酸激酶EC2.7.4.1,Ppk、多聚磷酸‑腺苷酸磷酸转移酶EC2.7.4.‑,Pap的固定化酶,制备得到的固定化酶可多次重复使用,数次重复使用后酶催化的活力下降较少,相比于现有技术取得了更优的技术效果。

主权项:1.一种生物酶法制备三磷酸腺苷二钠的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)制备固定化酶,所述固定化酶中为腺苷激酶EC2.7.1.20,AK、多聚磷酸激酶EC2.7.4.1,Ppk、多聚磷酸-腺苷酸磷酸转移酶(EC2.7.4.-,Pap);(2)在含有腺苷、六偏磷酸钠、磷酸二氢钠、硫酸镁的反应体系中,加入固定化酶,调节pH值为7.0-7.5,37-45℃下搅拌反应6-10h;(3)反应液过滤回收固定化酶,过滤液经过离子交换树脂初步纯化获得粗ATP;(4)粗ATP溶解于水中,NaOH调节pH为2.5-3.5,加入乙醇重结晶获得三磷酸腺苷二钠;所述步骤(1)中的固定化酶是以粒度为100-400目的C18键合改性硅胶作为固定化载体;步骤(1)中的所述固定化腺苷激酶EC2.7.1.20,AK、多聚磷酸激酶EC2.7.4.1,Ppk、多聚磷酸-腺苷酸磷酸转移酶(EC2.7.4.-,Pap)的浓度比为1-2:1-3:1-3;所述步骤(2)中腺苷、六偏磷酸钠、磷酸二氢钠、硫酸镁的重量比例为5-10:4-8:1-2:3-6。

全文数据:

权利要求:

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