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一种提高酿酒酵母粘附成膜能力的方法 

申请/专利权人:南京工业大学

申请日:2022-02-14

公开(公告)日:2024-06-25

公开(公告)号:CN114480155B

主分类号:C12N1/19

分类号:C12N1/19;C12N15/81;C12R1/865

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.25#授权;2022.05.31#实质审查的生效;2022.05.13#公开

摘要:本发明公开了一种提高酿酒酵母成膜能力的方法,通过在原始酿酒酵母细胞表面展示粘附素FimH构建得到重组酿酒酵母,所得重组酿酒酵母可有效提高粘附成膜能力。本发明所构建的酿酒酵母菌株,其粘附成膜能力提高了1.5‑2.6倍,通过提高细胞粘附成膜能力,可以促进细胞在介质上的固定化生长,实现连续化生产过程,还可以提高细胞的群体生长密度,增强细胞的耐受性和对不利生产环境的抵抗力,提高细胞的反应性能和生产效率。

主权项:1.重组酿酒酵母在提高粘附成膜能力中的应用,其特征在于,所述重组酿酒酵母为在原始酿酒酵母细胞表面展示粘附素FimH构建所得;所述粘附素FimH的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示;所述在原始酿酒酵母细胞表面展示粘附素FimH为将粘附素FimH基因序列通过连接肽与酿酒酵母细胞表面锚定蛋白的基因序列连接得到基因片段,将所述基因片段插入表达载体中,再将其转入酿酒酵母宿主细胞,即得重组酿酒酵母;用于细胞表面展示的基因构建物从5’端到3’端依次包括以下操作性相连的元件:(a)粘附素FimH的基因序列;(b)柔性连接肽的基因序列;(c)酿酒酵母细胞表面锚定蛋白的基因序列;其中,当所述酿酒酵母为酿酒酵母BY4742时,所述酿酒酵母细胞表面锚定蛋白为α-凝集素的锚定序列Sag1C;当所述酿酒酵母为酿酒酵母BY4741时,所述酿酒酵母细胞表面锚定蛋白为α-凝集素的锚定序列Sag1C或细胞壁蛋白Sed1;当所述酿酒酵母为酿酒酵母W303-1A时,所述酿酒酵母细胞表面锚定蛋白为α-凝集素的锚定序列Sag1C;所述α-凝集素的锚定序列Sag1C、细胞壁蛋白Sed1的核苷酸序列分别如SEQIDNo.4、SEQIDNo.5所示;所述连接肽为柔性连接肽。

全文数据:

权利要求:

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