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申请/专利权人：广州飞来爱生命科技有限公司
申请日：2023-01-03
公开（公告）日：2024-06-28
公开（公告）号：CN116144592B
主分类号：C12N5/0783
分类号：C12N5/0783;A61K35/17;A61K39/395;A61P35/00;A61K9/06
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.28#授权;2024.06.21#专利申请权的转移;2024.04.12#专利申请权的转移;2023.06.09#实质审查的生效;2023.05.23#公开
摘要：本发明公开了NK细胞、抗肿瘤增效复合物以及其应用。该NK细胞具有高表达CD158a、CD158b、CD158ek、CD94、CD16、CD314、CD335、CD337、CD226和CD56的表型，并且高表达IL‑6、IL‑8、IL‑10、MMP、Senpl、Perforin、和GranzymeB基因；同时还通过体外实验证实了其具有明显的杀伤胃癌、肝癌、卵巢癌、胰腺癌、宫预癌的杀伤效果。本发明还利用温敏性水凝胶制得了一种增效复合物，动物实验证实了该增效复合物可显著降低淋巴癌细胞荷瘤小鼠肿瘤组织CD47表达水平，相对于抗CD47抗体具有增效抗肿瘤作用。
主权项：1.一种NK细胞的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：获得BEWO细胞和纯化的NK细胞，所述纯化的NK细胞由脾脏分离得到；以及三维培养所述纯化的NK细胞，以得到滋养后的NK细胞；所述三维培养的体系包括用迁移渗透膜分隔的上层培养体系和下层培养体系，将所述纯化的NK细胞置于下层培养体系中培养，将所述BEWO细胞置于上层培养体系中培养，将所述三维培养的体系于37℃、5%CO2条件下体外共培养15天，即可得到滋养后的NK细胞；将所述纯化的NK细胞置于下层培养体系中培养的步骤包括：于Transwell膜嵌套小室内壁用40µLBME培养基和20µL胶原蛋白I培养基混合后包被，4℃风干，每孔加入1.5mLGT-T551H3培养液，并同时接种107个纯化的NK细胞，所述下层培养体系还包含500UmLIL-2和10%FBS；将所述BEWO细胞置于上层培养体系中培养的步骤包括：于Transwell膜上小室中加入含有10%FBS和1%PS的MEM培养液，同时接种BEWO细胞至密度为1×107cellsmL。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 广州飞来爱生命科技有限公司 NK细胞、抗肿瘤增效复合物以及其应用
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