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一种多通道活体显微成像系统及方法 

申请/专利权人:浙江大学

申请日:2022-09-29

公开(公告)日:2024-06-28

公开(公告)号:CN115500792B

主分类号:A61B5/00

分类号:A61B5/00;G02B21/00

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.28#授权;2023.01.10#实质审查的生效;2022.12.23#公开

摘要:本发明公开了一种多通道活体显微成像系统和方法。系统基于可见光多光子和近红外二区荧光共聚焦显微镜,该系统包括:飞秒激光器,滤光小孔,准直透镜,反射镜,长波通二向色镜,X‑Y扫描振镜,扫描透镜,筒镜,显微物镜,带通滤光片,荧光探测器。该方法包括:由单个飞秒光源以点激发的方式激发生物组织内的荧光物质,同时产生频率上转换和频率下转换荧光;荧光经系统多次分束,并同时接收;由振镜扫描每个像素点的信号并生成图像,将获得的图像按需求赋伪彩色并融合形成多通道图像。本发明相较于普通的多光子共聚焦显微镜而言,仅使用单个飞秒激光进行激发,且能够利用频率上下转换荧光同时进行成像,拓展成像通道,实现对组织内多个组分的同时成像。

主权项:1.一种多通道活体显微成像系统,其特征在于,包括同轴依次设置的飞秒激光器(1),滤光小孔(2),准直透镜(3),反射镜(4);沿反射镜(4)反射方向设置第一长波通二向色镜(19),沿第一长波通二向色镜(19)的反射方向依次设置X扫描振镜(5)、Y扫描振镜(6);沿扫描振镜(6)的反射方向依次设置扫描透镜(7),筒镜(8),第二长波通二向色镜(9),显微物镜(10),待测生物样本(11);沿第一长波通二向色镜(19)的透射方向依次放置长波通滤光片(20)、第一荧光收集透镜(21)、共聚焦小孔(22)、第一荧光探测器(23);沿所述第二长波通二向色镜(9)的反射方向设置第三长波通二向色镜(12);沿所述第三长波通二向色镜(12)的透射方向依次设置第一带通滤光片(13)、第二荧光收集透镜(14)和第二荧光探测器(15);沿所述第三长波通二向色镜(12)的反射方向依次设置第二带通滤光片(16)、第三荧光收集透镜(17)和第三荧光探测器(18);所述飞秒激光器(1)具体采用808nm飞秒激光器;所述第二长波通二向色镜(9)具体采用800nm长波通二向色镜;所述第一长波通二向色镜(19)具体采用1000nm长波通二向色镜;所述第三长波通二向色镜(12)具体采用570nm长波通二向色镜;所述第一带通滤光片(13)具体采用570-800nm带通滤光片;所述第二带通滤光片(16)具体采用495-540nm带通滤光片;所述长波通滤光片(20)具体采用1000nm长通滤光片;所述第二荧光探测器(15)具体采用红色光敏感的PMT;所述第三荧光探测器(18)具体采用绿色光敏感的PMT;所述探测器(23)具体采用近红外光敏感的探测器。

全文数据:

权利要求:

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