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申请/专利权人：中国科学院昆明动物研究所
摘要：本发明公开了一种将病毒工具注入非人灵长类动物黑质实现DJ‑1基因原位敲除的方法及其应用。所述方法包括步骤：设计一套特异性敲除神经元中DJ‑1基因外显子的sgRNA，构建与SaCas9共表达的载体；通过体外细胞转染测试，挑选高效的DJ‑1基因敲除载体包装成高质量的AAV9；再通过非人灵长类动物脑内转染测试，确定病毒工具的有效性；之后，利用微量注射器将所述病毒工具直接注入非人灵长类动物的黑质，实现DJ‑1基因的原位敲除。本发明所述具有高效敲除DJ‑1基因的病毒工具原位转染猕猴黑质能够在短时间内获得大量具备核心帕金森病表型且能模拟人类基因突变的“病因性”帕金森病猕猴模型，为该病的早期预警与诊断标志物发掘提供借鉴。
主权项：1.一种将病毒工具注入非人灵长类动物黑质实现DJ-1基因原位敲除的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：设计一套特异性敲除神经元中DJ-1基因外显子的sgRNA，构建与SaCas9共表达载体；通过体外细胞转染测试，挑选高效的DJ-1基因敲除载体包装成高质量的AAV9；再通过非人灵长类动物脑内转染测试，验证病毒工具的有效性，获得帕金森病建模所需的病毒工具；利用微量注射器将所述病毒工具直接注入非人灵长类动物的黑质，实现DJ-1基因的原位敲除。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国科学院昆明动物研究所 一种将病毒工具注入非人灵长类动物黑质实现DJ-1基因原位敲除的方法及其应用
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