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申请/专利权人：南京农业大学
摘要：本发明公开了一种利用紫杉醇加倍玉米单倍体的方法，包括种子消毒、种子发芽、切芽、紫杉醇处理、芽苗移栽等步骤，属于植物育种技术领域。本发明采用紫杉醇进行玉米单倍体加倍，紫杉醇是可以口服的药，对人体基本无害，对人和环境无毒无害。与现行的化学法处理相比，本发明方法对处理的植物无害，不产生死苗和畸形苗，处理后的芽苗移栽后存活率很高，为育种节约了大量的宝贵的单倍体种子，提高了育种效率，也提高了单倍体染色体加倍成功率，并且还降低了对操作者的身体和环境的危害，减少了用工量、降低了育种成本。
主权项：1.一种利用紫杉醇加倍玉米单倍体的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）种子消毒：将玉米单倍体籽粒冲洗干净后晾干，然后置于消毒水中浸泡，取出后用无菌水清洗干净，得到消毒后的玉米单倍体籽粒；（2）种子发芽：取消毒并洗净的种子发芽盒，底部垫上湿润的无菌发芽纸后，装入消毒后的玉米单倍体籽粒，再盖上一层湿润的无菌发芽纸，置于28℃的培养箱中培养2-6天；（3）芽苗收集：在培养箱中培养36h后，每隔5-6h挑选出胚芽鞘长于10mm的芽苗，收集在垫有湿润发芽纸的种子发芽盒内，盖上一层湿润的无菌发芽纸后，置于10-12℃的冷藏箱中备用，收集3-5次后的芽苗作为第一批芽苗，后面收集的作为第二批芽苗；（4）切芽：对第一批芽苗进行切芽处理，得到切芽后的种子；（5）紫杉醇处理：将切芽后的种子浸没在紫杉醇浓度为100-400μM的紫杉醇乳浊液中，密封后置于20-25℃下黑暗处理16-24h，结束后取出并用水清洗；（6）芽苗移栽：将清洗后的芽苗移栽至育苗穴盘中，在温室内生长至三叶期后，再移栽至大田栽培；（7）将第二批芽苗重复步骤（4）、（5）、（6）；步骤（5）中，所述紫杉醇乳浊液的制备方法：先将紫杉醇粉末加入到二甲基亚砜中溶解，得到紫杉醇溶液，边搅拌边将紫杉醇溶液逐滴加入到质量浓度为0.025%-0.1%的吐温-80溶液中，最后用质量浓度为0.025%-0.1%的吐温-80溶液定容，即得；所述二甲基亚砜在紫杉醇乳浊液中的体积浓度为2%。
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百度查询： 南京农业大学 一种利用紫杉醇加倍玉米单倍体的方法
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