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申请/专利权人：厦门大学
摘要：本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种载体骨架、基于该载体骨架和东方肉座菌低背景工程菌株的定位表达系统及应用。其中，载体骨架基因序列如SEQIDNO.1所示，包括东方肉座菌△xyr1‑3的天冬氨酸蛋白水解酶上下游同源臂、抗性标记基因表达盒和目的基因表达盒插入的酶切位点，方便不同基因的表达和突变研究，如蛋白酶在该系统的表达和突变研究。本发明构建的基于载体骨架pUC‑ASPG和东方肉座菌胞外蛋白低背景工程菌株的定位表达系统，通过敲除xyr1基因后，菌株△xyr1‑3在诱导条件下基本不表达纤维素酶和半纤维素酶，消除了纤维素酶和半纤维素酶的本底表达，使东方肉座菌△xyr1‑3适合于纤维素酶、半纤维素酶及其它真菌分泌蛋白的表达和突变研究。
主权项：1.一种基于载体骨架和东方肉座菌低背景工程菌株的定位表达系统，其特征在于，包括载体骨架、东方肉座菌∆xyr1-3、启动子和终止子；所述东方肉座菌∆xyr1-3是以东方肉座菌（Trichodermaorientalis）EU7-22为出发菌株，敲除xyr1基因得到的；所述东方肉座菌EU7-22，其保藏编号为CCTCCNO：M20211189；所述载体骨架的基因序列如SEQIDNO.1所示；通过在载体pUC-eASP的5’侧翼序列UAsp和3’侧翼序列DAsp之间插入含有抗性筛选标记基因的表达盒得到，所述载体pUC-eASP包括天冬氨酸蛋白水解酶的5’侧翼序列UAsp和3’侧翼序列DAsp；所述载体pUC-eASP的序列如SEQIDNO.2所示；所述抗性筛选标记基因为G418。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 厦门大学 一种载体骨架、基于该载体骨架和东方肉座菌低背景工程菌株的定位表达系统及应用
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