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申请/专利权人：深圳市宝安区人民医院
摘要：本发明公开了一种基于双重信号放大的microRNA检测方法，包括如下步骤：制备Cas13a与crRNA的复合物，将待测样品RNA、磁珠、报告RNA与其混合孵育，随后将缓冲液、含生物素标记的Bio‑H1探针及磁珠混合，加入H2探针和Ruphen32+，利用磁力分离架洗去游离的H2探针和Ruphen32+，再与TPA混合后，检测ECL值，根据线性回归方程确定待测样品中microRNA浓度。本发明的microRNA检测方法特异性强，灵敏度高，检测过程不受外界温度和环境限制，并且具备良好的时效性，适用于靶microRNA的高灵敏检测。
主权项：1.一种基于双重信号放大的microRNA检测方法，其特征在于，包括如下步骤：1针对靶标microRNA设计特异性的crRNA、报告RNA、含生物素标记的Bio-H1探针及H2探针；2制备Cas13a与crRNA的复合物，形成复合物1；3利用生物素-亲和素系统制备报告RNA和磁珠的复合物，形成复合物2；4将待测样品的RNA、2所述复合物1及3所述复合物2混合，孵育，形成复合物3；5利用生物素-亲和素系统制备1所述Bio-H1探针和磁珠的复合物，洗去游离的Bio-H1探针，形成复合物4；6将复合物3与复合物4混合，加入H2探针和Ruphen32+，轻轻振荡，洗去游离的H2探针和Ruphen32+，形成复合物5；7将复合物5与TPA混合后，检测ECL值，通过线性回归分析靶标microRNA与发光强度的对应关系，得出线性回归方程，根据线性回归方程确定待测样品中microRNA浓度。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 深圳市宝安区人民医院 一种基于双重信号放大的microRNA检测方法
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