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一种基于断裂内含子的RNA反式剪接系统及应用 

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申请/专利权人:浙江大学

摘要:本发明公开了一种基于断裂内含子的RNA反式剪接系统及应用,属于生物技术领域。所述系统包括编码前体RNA分子的5'RNA构建体和3'RNA构建体,5'RNA构建体表达的5'RNA包括5'外显子、5'内含子和5'EGS,3'RNA构建体表达的3'RNA包括3'EGS、IGS、3'内含子和3'外显子;5'EGS和3'EGS互补使得5'内含子和3'内含子组装形成完整内含子,触发剪接反应,形成包含完整外显子的成熟mRNA。本发明提供的RNA反式剪接系统通过向断裂的内含子上融合EGS序列,大幅提高了RNA反式剪接效率,该反式剪接系统可以应用到基因调控研究、RNA传感器以及生物计算的构建。

主权项:1.一种基于断裂内含子的RNA反式剪接系统,其特征在于,所述系统包括编码前体RNA分子的5'RNA构建体和3'RNA构建体,5'RNA构建体表达的5'RNA从5'端到3'端包括5'外显子、5'内含子和5'EGS,3'RNA构建体表达的3'RNA从5'端到3'端包括3'EGS、IGS、3'内含子和3'外显子;5'外显子和3'外显子分别为完整外显子于5'剪接位点断裂后的两个片段,5'外显子的3'端包含5'剪接位点;5'内含子和3'内含子分别为第一类内含子于环位置断裂后的两个片段,3'内含子的3'端包含3'剪接位点;5'EGS包含与3'EGS互补的序列,5'EGS和3'EGS由5~50nt的随机序列构成,两者互补使得断裂的5'内含子和3'内含子组装;IGS包含与3'外显子5'端第4位至第9位碱基互补的序列a、与5'外显子中5'剪接位点配对的碱基和与5'剪接位点上游5个碱基互补的序列b,互补形成的双链结构触发剪接反应。

全文数据:

权利要求:

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