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申请/专利权人：上海市徐汇区中心医院
摘要：本发明提供一种多种水溶性维生素B2、B5、B6、B9、MMA的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：1取血液样本，直接用缓冲液稀释，得待上样样本；2对得待上样样本进行阴离子交换固相萃取柱萃取，获得所需洗脱液；3洗脱液40℃吹干复溶得到待测样本；4然后对待测样本进行LC‑MSMS分析，检测获得水溶性维生素的含量。本发明方法可以同时检测多种水溶性维生素，该方法在固相萃取前无需沉淀吹干，仅需简单稀释后即可上样，对比沉淀吹干等复杂方法提高了检测效率，节省了前处理时间，避免了因蛋白沉淀造成的样本损失，满足临床准确快速检测的需求。
主权项：1.一种多种水溶性维生素的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：1取血液样本，加入缓冲液进行稀释，得待上样样本；所述缓冲液采用磷酸缓冲溶液或硼酸缓冲溶液，pH5-7；2对待上样样本进行阴离子交换固相萃取柱萃取，获得洗脱液；所述步骤2中采用以下洗脱溶液洗脱：质量体积浓度0.1～1gL抗坏血酸；质量百分比浓度为1～10％的乙酸或甲酸；质量百分比浓度为40～60％乙腈，其余水，pH3-4；3将洗脱液40℃吹干，加入复溶液后得到待测样本；所述复溶液为含有质量体积浓度0.1～1gL抗坏血酸的水溶液；4对待测样本进行液相色谱串联质谱分析，检测获得水溶性维生素B2、B5、B6、B9及MMA的含量；所述液相色谱条件为，采用C18色谱柱，规格为2.6μm100×3.0mm，流动相A：甲酸或者乙酸水溶液，pH2～3；流动相B：甲酸或者乙酸甲醇溶液，pH2～3；柱温：室温；所述流动相采用梯度洗脱；流速：0.5-0.7mLmin；进样量：10-30μL；进样时间：5min，具体参数如下表： ；所述质谱条件为采用先负离子后切换为正离子扫描；气帘气：30psi；碰撞气：12psi；雾化气：60psi；加热气：60psi；正离子源电压：5500V，负离子电压-4500V；离子源温度：550℃。
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权利要求：
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