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申请/专利权人：淇嘉科技(苏州)有限公司
摘要：本发明提供了一种具有免疫细胞的结肠类器官构建方法，该方法在不引入任何外源细胞，且不进行遗传改造的前提下，实现了功能性巨噬细胞包含型结肠类器官的诱导分化。功能上，巨噬细胞具备吞噬功能，在不同诱导条件下可发生M1与M2型极化。该技术克服了当下类器官模型在谱系多样性上的短板，适合作为新一代人源精细化肠道类器官模型，为肠病的分子机制研究、疾病模拟、药物靶点发现、药效筛选等提供精准研究工具。
主权项：1.一种具有免疫细胞的结肠类器官构建方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：S1：诱导产生内胚层及小部分中胚层hPSC依次在培养基A和培养基B中各培养1-2天，培养基A添加有BMP4、ActivinA、SM1型神经营养添加剂，培养基B添加有ActivinA、FGF2、SM1型神经营养添加剂；S2：诱导产生后肠管衍生物在培养基C中继续培养6-7天，培养基C添加有FGF4、Wntβ-连环蛋白激活剂、VEGF、SCF以及B27营养添加剂、N2营养添加剂、造血细胞培养基StemPro-34；此后，收集2D细胞单层上产生的3D中后肠衍生物后，使用Cultrex基质胶进行3D包被，并加入S3分化培养基；S3：诱导产生具备巨噬细胞的多谱系结肠类器官再依次在培养基D中培养3-4天和培养基E中培养28-29天，培养基D添加有BMP2、EGF、Wntβ-连环蛋白激活剂以及B27营养添加剂、N2营养添加剂、造血细胞培养基StemPro-34，培养基E添加有EGF、VEGF、M-CSF、BMP抑制剂、Wntβ-连环蛋白激活剂以及B27营养添加剂、N2营养添加剂、造血细胞培养基StemPro-34。
全文数据：
权利要求：
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