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申请/专利权人:四川中烟工业有限责任公司
摘要:本发明公开了一种烟草甲RNAi干扰片段制备方法及其用途,通过制备出RNAi干扰片段并进行使用,干扰烟草甲海藻糖合成酶基因的效果显著,为安全、高效的生物防治提供了新的防治方法和靶标基因。本发明选择海藻糖合成酶基因作为RNA干扰靶标,破坏昆虫海藻糖合成通路,阻止海藻糖的转化合成等生理过程,可达到害虫防治的目的。
主权项:1.一种烟草甲RNAi干扰片段制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1,选取烟草甲海藻糖合成酶基因的部分序列,具体见序列1;步骤2,设计PCR扩增引物的5’端,分别加上T7启动子序列,得到上游引物序列及下游引物序列,上游引物序列具体见序列2,下游引物序列具体见序列3;步骤3,使用引物PCR扩增,获得DNA片段,利用体外转录试剂盒合成dsRNA,纯化、干燥;步骤4,将干燥的dsRNA用40ul无核酸酶水溶解RNA沉淀,获得最终使用的RNA干扰片段。
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权利要求:
百度查询: 四川中烟工业有限责任公司 一种烟草甲RNAi干扰片段制备方法及其用途
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