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结直肠癌类器官培养基及结直肠癌类器官的培养方法 

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申请/专利权人:成都华医再生科技有限公司

摘要:本发明提供了一种结直肠癌类器官培养基及结直肠癌类器官的培养方法,属于类器官培养领域。采用本发明培养基是以AdvancedDMEMF12为基础培养基添加了1mMN‑acetylcysteine、1xN2添加剂、1xB27添加剂、2mMGlutaMAX、1xHEPES、100UmL青霉素和链霉素、0.5μMA8301、5μMSB202190、1nMGastrinI和5mMNicotinamide,该培养基能够快速培育得到结直肠癌类器官,该类器官保持90%以上的肿瘤特征一致性,同时可以有效避免正常细胞的污染,用于药物筛选的准确性更高,应用前景优良。

主权项:1.一种结直肠癌类器官的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:取分离上皮层的人结直肠癌组织后,清洗,切碎,加消化液消化,离心,取沉淀使用基质胶重悬,待基质胶凝固后,加入类器官培养基进行培养,即得;所述培养时间为3天及以上;培养过程中2-3天更换一次培养基;所述培养温度为37℃;所述消化液为结直肠癌组织消化液;所述切碎具体指将清洗后的分离上皮层的人结直肠癌组织切为体积小于或等于3mm*2mm*1mm的碎块;所述消化液环境为在4℃消化30分钟;所述类器官培养基以AdvancedDMEMF12为基础培养基添加了1mMN-acetylcysteine、1xN2添加剂、1xB27添加剂、2mMGlutaMAX、1xHEPES、100UmL青霉素和链霉素、0.5μMA8301、5μMSB202190、1nMGastrinI和5mMNicotinamide。

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权利要求:

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