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申请/专利权人：四川中科奥格生物科技有限公司
摘要：本发明提供了一种自发性高脂血症动物模型的构建方法，它包括如下步骤：1制备APOE和LDLR双等位基因敲除的细胞株；2制备重构胚；3获得仔猪。本发明自发性高脂血症动物模型的构建方法，将特定的sgRNA构建的CRISPRCas9系统，应用于猪的APOE或LDLR双等位基因编辑，使获得APOE和LDLR双等位基因敲除细胞株的成功率增加，降低了自发性高脂血症动物模型的构建成本，并且使之得到的APOE和LDLR基因编辑型猪的TC是野生型猪8～9倍，LDL‑C是野生型猪的11～13倍。本发明方法成本低，动物模型高脂血症的症状典型，具体实际推广应用价值。
主权项：1.一种自发性高脂血症动物模型的构建方法，其特征在于：它包括如下步骤：1取CRISPRCas9载体转染猪耳成纤维细胞，富集带绿色荧光细胞培养，测序鉴定获得APOE和LDLR双等位基因敲除的细胞株；2取步骤1所得细胞株作为核供体，猪卵母细胞去核后作为受体，进行体细胞核移植，得重构胚；3取步骤2所得重构胚培养12-24h，移入母猪体内，饲养母猪至产仔，取仔猪即得；所述CRISPRCas9载体是连接有与APOE-sgRNA2对应的双链DNA的载体，和连接有与LDLR-sgRNA3对应的双链DNA的载体；所述APOE-sgRNA2的核苷酸序列如SEQIDNO.2或SEQIDNO.10所示；所述LDLR-sgRNA3的核苷酸序列如SEQIDNO.7或SEQIDNO.15所示。
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权利要求：
百度查询： 四川中科奥格生物科技有限公司 一种自发性高脂血症动物模型的构建方法
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