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一种用于生产2’-脱氧胞苷-5’-单磷酸的工程菌株及其构建方法与应用 

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申请/专利权人:汇海(苏州)生物技术有限公司

摘要:本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种用于生产2’‑脱氧胞苷‑5’‑单磷酸的工程菌株及其构建方法与应用,本发明使用CRISPR技术获得基因工程菌株E.coliBL21ΔCDD,并以基因工程菌株E.coliBL21ΔCDD为基因表达宿主,构建脱氧核苷激酶和多聚磷酸激酶基因的共表达基因工程菌株E.coliBL21ΔCDD+DNK+PPK。本发明使用该工程菌株进行dCMP产品的生物合成,可以显著降低了原料的残留,避免出现2’‑脱氧尿苷、2’‑脱氧尿苷‑5’‑单磷酸等副产物,纯度达90%以上,显著降低后续分离提纯工艺难度,实现生物法合成2’‑脱氧胞苷‑5’‑单磷酸的产业化应用。

主权项:1.一种用于生产2’-脱氧胞苷-5’-单磷酸的工程菌株的构建方法,其特征在于:使用CRISPR基因编辑技术,对E.coliBL21菌株基因组中的胞苷脱氨酶进行敲除失活,获得基因工程菌株E.coliBL21ΔCDD,并以基因工程菌株E.coliBL21ΔCDD为基因表达宿主,构建导入脱氧核苷激酶和多聚磷酸激酶基因的共表达基因工程菌株E.coliBL21ΔCDD+DNK+PPK。

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权利要求:

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