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申请/专利权人：中国海洋大学

摘要：本发明公开了一种凝胶光学试剂盒及其应用，属于检测技术领域，一种凝胶光学试剂盒包括黄嘌呤氧化酶的缓冲液、N‑乙基马来酰亚胺的缓冲液和光学检测水凝胶；所述光学检测水凝胶包括无配体上转换纳米颗粒、Co3O4拟过氧化物纳米酶、显色剂和琼脂糖，光学检测水凝胶固定在离心管盖中。本发明将黄嘌呤氧化酶催化特异性反应、拟过氧化物纳米酶、过氧化物酶催化显色底物和上转换纳米颗粒结合，实现次黄嘌呤的比色、荧光传感，利用手机或相机与ImageJ等图像分析软件结合。采集和分析光学信号变化，摆脱对大型光学设备的依赖，能够实现次黄嘌呤的定量检测，可作为水产品中次黄嘌呤的现场检测方法应用于水产品新鲜度的判断和品质控制。

主权项：1.一种凝胶光学试剂盒在检测水产品新鲜度中的应用，其特征在于，所述凝胶光学试剂盒，包括含黄嘌呤氧化酶的缓冲液、含N-乙基马来酰亚胺的缓冲液和光学检测水凝胶；所述光学检测水凝胶包括含镧系元素掺杂的无配体上转换纳米颗粒、Co3O4拟过氧化物纳米酶、显色剂和琼脂糖，所述光学检测水凝胶固定在离心管的管盖中；所述含镧系元素掺杂的无配体上转换纳米颗粒采用共沉淀法和酸处理法制备，具体包括：1）将氯化钇、氯化镱、氯化铒、油酸和1-十八烯混合，在惰性气体保护下于100-250℃剧烈搅拌至透明均一后，冷却至20-60℃，再加入NaOH和NH4F的甲醇溶液，并在惰性气体保护下剧烈搅拌反应10-90min，接着除去甲醇，再快速升温至250-350℃反应30-240min，再将所得产品冷却至室温，分离、洗涤、干燥，得到所述油酸包裹的六方相上转换纳米颗粒；2）将75mL油酸包裹的六方相上转换纳米颗粒的乙醇分散液与25mL盐酸混合，超声处理5-30min，室温下剧烈搅拌过夜，最后离心分离获得含镧系元素掺杂的无配体上转换纳米颗粒；所述Co3O4拟过氧化物纳米酶为立方相，粒径为10-75nm；所述显色剂包括3,3',5,5'-四甲基联苯胺、邻苯二胺、4-氨基安替比林和N-乙基-N-3-磺丙基-3-甲基苯胺钠盐的一种或几种；所述应用包括以下步骤：向预处理后的水产品样品溶液中加入N-乙基马来酰亚胺缓冲液，进行孵育，将孵育后的溶液加入塑料离心管中，并加入黄嘌呤氧化酶的缓冲液，混合反应，盖上管盖，倒扣离心管使混合溶液与光学检测水凝胶在加热条件下反应，在自然光下，使用手机或相机拍摄离心管管盖及其内部凝胶，对凝胶图片进行分析，次黄嘌呤的浓度与凝胶图片的RGB-Green值呈负相关；或者在黑暗条件下，使用激光器照射离心管管盖及其内部凝胶，使用手机或相机拍摄离心管管盖及其内部凝胶的荧光，对凝胶的荧光图片进行分析，次黄嘌呤浓度与凝胶的荧光图片的RGB-Green值呈负相关。

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百度查询： 中国海洋大学 一种凝胶光学试剂盒及其应用