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申请/专利权人：扬州大学
摘要：本发明公开了一种基因表达载体、引物、构建方法及应用，引物包括：第一引物对，用于扩增获得第一DNA片段，所述第一DNA片段是水稻Wxb基因的一段序列，包括其自身启动子；第二引物对，用于扩增获得第一搭桥片段；第三引物对，用于扩增获得第二搭桥片段；第四引物对，用于扩增第一搭桥片段和第二搭桥片段，获得第二DNA片段，所述第二DNA片段为包含Wxb第五外显子第52位碱基T突变为C的DNA序列。本发明基于已有等位基因功能位点和效应分析，采用人工定点突变的方式，在糯性水稻背景下实现了具有透明籽粒软米的创制，丰富了现有软米创制技术体系，为稻米外观和食味品质的协同改良提供了新的技术路线。
主权项：1.一种基因表达载体引物，用于制备含有单碱基突变的Wxb基因的水稻，其特征在于，包括：第一引物对，用于扩增获得第一DNA片段，所述第一DNA片段是水稻Wxb基因的一段序列，包括其自身启动子：SEQIDNO.15’GTGCCACCGTCGCAGGAGAAGAGATGTGA3’SEQIDNO.25’GTCTTGCTCCAGGGGGCCATCTCGGCG3’；第二引物对，用于扩增获得第一搭桥片段：SEQIDNO.35’GCAACAGCTAGACAACCACCATGTCG3’SEQIDNO.45’GGTTGTCTTTGTGATCAACTCCAGTG3’；第三引物对，用于扩增获得第二搭桥片段：SEQIDNO.55’CACTGGAGTTGATCACAAAGACAACC3’SEQIDNO.65’CTCCACAGCCATAAGCCACACCAACT3’；第四引物对，用于扩增第一搭桥片段和第二搭桥片段，获得第二DNA片段，所述第二DNA片段为包含Wxb第五外显子第52位碱基T突变为C的DNA序列：SEQIDNO.35’GCAACAGCTAGACAACCACCATGTCG3’SEQIDNO.65’CTCCACAGCCATAAGCCACACCAACT3’。
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百度查询： 扬州大学 一种基因表达载体、引物、构建方法及应用
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