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申请/专利权人：浙江杭科细胞工程有限公司
摘要：本发明适用于干细胞培养技术领域，提供了一种子宫内膜干细胞的制备方法，包括如下步骤：1）在无菌条件下取得离体的子宫内膜组织，进行预处理；2）采用长波紫外线照射处理5‑10min；3）在氧浓度为1‑5%的低氧环境下培养4‑5h；4）低氧培养后清洗，进行一次消化，过滤得到一次滤液和一次消化后的子宫内膜组织；5）将一次消化后的子宫内膜组织剪成1‑2mm3碎块，进行二次消化，过滤得到二次滤液；6）将一次滤液和二次滤液合并离心，收集细胞，与培养基混合后接种至培养容器中培养。本发明通过紫外线照射和低氧培养，实现去除子宫内膜中其他成熟分化细胞，保留子宫内膜干细胞的目的，筛选效率高，筛选细胞纯度高。
主权项：1.一种子宫内膜干细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：在无菌条件下取得离体的子宫内膜组织，进行预处理；将预处理后的子宫内膜组织放入装有细胞培养液的石英玻璃培养容器中，采用长波紫外线照射处理5-10min；将紫外线照射处理后的子宫内膜组织在氧浓度为1-5%的低氧环境下培养4-5h；将低氧培养后的子宫内膜组织用无菌D-hanks溶液清洗2次，然后与胰蛋白酶消化液混合进行一次消化，过滤得到一次滤液和一次消化后的子宫内膜组织；将一次消化后的子宫内膜组织剪成1-2mm3碎块，与二次消化液混合进行二次消化，经200-300目的滤网过滤，得到二次滤液和二次消化后的子宫内膜组织；将一次滤液和二次滤液合并以1300-1600rmin离心，收集细胞，用HBSS液冲洗细胞3次，与培养基混合后接种至培养容器中培养，每隔2-4天更换新鲜的培养基。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江杭科细胞工程有限公司 一种子宫内膜干细胞的制备方法
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