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具有内切葡聚糖酶活性的多肽及其用途 

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申请/专利权人:丹尼斯科美国公司

摘要:本文公开了纤维素酶变体或其活性片段,以及编码所述纤维素酶变体或其活性片段的多核苷酸,其中所述纤维素酶变体或其活性片段具有内切葡聚糖酶活性。本文还公开了组合物,所述组合物包含所述纤维素酶变体或其活性片段;载体和或宿主细胞,所述载体和或宿主细胞包含编码所述纤维素酶变体或其活性片段的多核苷酸;和方法,所述方法用于制备和或使用所述纤维素酶变体或其活性片段和或含有所述纤维素酶变体或其活性片段的组合物;其中所述纤维素酶变体或其活性片段具有内切葡聚糖酶活性。

主权项:1.一种纤维素酶变体,其中亲本纤维素酶由SEQIDNO:1的氨基酸序列组成,且相比于SEQIDNO:1所述变体中的突变是选自下组的突变组合:1K4V-K44V-S77K-E90A-S135T-A142P-Q154E-L192V-V208H-S221L-A247T和缺失:S232、T233、S234、T235、T236、S237、T238、K239、A240、T241、S242和T243;2S32Y-T102K-A142P-G204S-V208H-A247T和缺失:T233、S234、T235、T236、S237、T238、K239、A240、T241、S242和T243;3K4V-K44V-S77K-N80S-T102K-G112T-S135T-A142P-L192V和缺失:T233、S234、T235、T236、S237、T238、K239、A240、T241、S242和T243;4S77M-A142P-K163V-V208H-A247T和缺失:T233、S234、T235、T236、S237、T238、K239、A240、T241、S242和T243;5S77M-G87A-A99H-G112T-A142P-S232T-T236A和缺失:T233;6S23L-A142P-D202E-S232T和缺失:T233;7Q36T-S77K-G87A-A142P-S153D-A161P-G204S-S221L-S237D;8S23L-S32Y-G112T-A142P-A161P-G204S-S217G-K227R-S237D;9K4V-Q36T-S77K-N80S-A142P-L192V-G204S-T210V-S221L;10F29W-G87A-E90A-A99Y-A142P-S153D-K227R-S237D;11K4V-S23L-S32Y-N80S-T102K-A142P-A161P-S237D;12S32Y-A142P-Q154E-K163V-S217G-K227R-T233A;13K4V-S77K-E90A-A142P-S157D-S217G-T233A-T238D和缺失:G214;14Q36T-S77K-G87A-A142P-S153D-A161P-G204S-S221L-S237D和缺失:D177;15T102K-A142P-Q154E-G204S-K227R;16G87A-A142P-A161P-L192V-G204S-T241A;17K4V-S77K-E90A-A142P-S157D-S217G-T233A-T238D;18S51T-N80S-A142P-L192V-V208H;19Q36T-V98Y-A142P-A161E-S225K;20Q36T-P136E-A142P-S225K-S249P;21A99Y-P136E-A142P-A161E-S221L;22S32D-A99Y-A142P-A161E-S249P;23K44V-A142P-A161P-K163V;24S32D-Q36T-G112S-A142P;25S32D-Q36T-S77M-S135T-A142P-A161P;26F29W-S77M-A99E-A142P;27S135T-A142P-K163V;28K4V-G112S-S135T-A142P-A161P;29S32D-Q36T-A99E-P136K-A142P;30G112S-P136K-A142P-S217M-S221M-T241L-G258K;31K4V-S77K-G112S-A142P-A194S-S249G-G258K;32P97S-G112V-P136S-A142P-A161E-K163V-P212S-S222A;33K44V-A142P-A161P-K163V-K227R-T236A;34Q36T-S51T-V98G-T116V-A142P-A161P-T233S和位置233之后的插入:TASTKATSTT;或35K4V-S32G-Q36T-S77M-G87A-T116V-A142P-A161P和位置233之后的插入:STTDTKATSTT。

全文数据:具有内切葡聚糖酶活性的多肽及其用途本申请要求提交于2016年12月16日的美国申请号62435,340和提交于2016年12月15日的孟加拉国申请号3062106的权益,将两篇文献的全部内容通过引用以其全文并入本文。本文公开了纤维素酶变体或其活性片段,以及编码所述纤维素酶变体或其活性片段的多核苷酸,其中这些纤维素酶变体或其活性片段具有内切葡聚糖酶活性。本文还公开了组合物,所述组合物包含所述纤维素酶变体或其活性片段;载体和或宿主细胞,所述载体和或宿主细胞包含编码所述纤维素酶变体或其活性片段的多核苷酸;和方法,所述方法用于制备和或使用所述纤维素酶变体或其活性片段和或含有所述纤维素酶变体或其活性片段的组合物;其中所述纤维素酶变体或其活性片段具有内切葡聚糖酶活性。以电子方式提交的序列表的引用该序列表的内容以ASCII文本文件格式电子提交,其文件名为20171211_NB41187WOPCT_SeqLst.txt,创建于2017年12月11日,且具有181千字节大小,并与本说明书同时提交。包含在该ASCII格式的文件中的序列表是本说明书的一部分并且以其全文通过引用并入本文。纤维素酶是糖苷水解酶,所述糖苷水解酶催化纤维素中β-1,4糖苷键的水解以将其分解成单糖或更短的多糖和寡糖。通常,纤维素酶含有被称为“接头”或“接头肽”的柔性间隔子分开的纤维素结合模块CBM和催化结构域。纤维素酶的催化结构域以酶学委员会EC和糖苷水解酶GH家族系统两者分类。酶委员会已经鉴定了两类纤维素酶,即内切纤维素酶其分类为EC3.2.1.4酶,并也称为内切葡聚糖酶、和外切纤维素酶其分类为EC3.2.1.91酶,也称为纤维二糖水解酶或外切葡聚糖酶。内切葡聚糖酶在无定形位点处随机切割内部键,这产生新的链末端,而外切葡聚糖酶从由内切葡聚糖酶产生的暴露链的末端切割2至4个单位。另一方面,GH家族系统基于酶结构和功能对纤维素酶进行分组,产生许多GH家族,包括例如GH家族5、6、7、8、9、10、12、16、18、19、26、44、45、48、51、61和74。已知纤维素酶可用于例如:洗涤剂组合物中;处理纺织品;作为动物饲料添加剂;在加工纸和纸浆中使纤维平滑,增强排水和脱墨;在食品工业中使从水果和蔬菜中提取和净化汁并使糖化;以及将生物质还原为葡萄糖,然后将该葡萄糖发酵并蒸馏以制备低CO2纤维素乙醇。纤维素酶用于纺织工业中通过例如去除绒毛从纱线或织物表面突出的未缠结的纤维末端和球粒pill通过一根或多根纤维固定在织物表面上的缠结的纤维束或球来改善含棉织物的触感和或外观,并且还有助于防止通过随后的消耗洗涤和磨损循环形成使服装看起来磨损的球粒。该方法被称为“去球depilling”或“生物抛光”。纤维素酶还用于赋予含棉牛仔布例如受损的或“石洗的”外观。该方法被称为“生物打磨”,并且已经在很大程度上替代了用于生成消费者所希望的柔软褪色的牛仔布的打磨。纤维素酶用于洗涤剂组合物中,例如,以增强污垢去除、去除球粒、增亮织物颜色和软化织物。添加纤维素酶的洗涤剂组合物通常还含有其他酶例如像蛋白酶,使得纤维素酶在这些其他酶存在下稳定是重要的和其他洗涤剂添加剂例如像表面活性剂。如果纤维素酶不稳定,例如蛋白酶将随时间降解纤维素酶,从而抵消与纤维素酶相关的洗涤益处。因此,本领域仍然需要在一种或多种其他酶存在下稳定的纤维素酶例如像蛋白酶和或一种或多种其他洗涤剂组分例如像表面活性剂。附图说明图1提供了pTTT-pyr2-stce1的质粒图。图2A-图2H提供了催化核心区域的比对,该比对是通过STCE1-WT纤维素酶及其变体与实例4中描述的其他GH45纤维素酶的MUSCLE多重序列比对产生的。图3A-图3B提供了接头区域的比对,该比对是通过STCE1-WT纤维素酶及其变体与实例4中描述的其他GH45纤维素酶的MUSCLE多重序列比对产生的。图4A-4B提供了C-末端区域的比对,该比对是通过STCE1-WT纤维素酶及其变体与实例4中描述的其他GH45纤维素酶的MUSCLE多重序列比对产生的。一个实施例涉及一种包含如下氨基酸序列的纤维素酶变体或其活性片段,所述氨基酸序列包含在对应于选自以下的SEQIDNO:1位置的两个或多个位置处的两个或更多个突变:i4、23、29、32、34、36、44、51、65、77、80、87、90、97、98、99、102、112、116、119、135、136、142、153、154、156、157、161、163、178、192、194、202、204、205、206、208、210、212、217、221、222、225、227、232、233、236、237、238、241、247、249、和258;ii4、29、32、36、51、77、80、87、90、102、112、116、135、136、142、153、154、161、163、192、204、210、217、221、225和227;iii4V、23L、29W、32DGY、34D、36T、44V、51T、65G、77KM、80S、87A、90A、97S、98GY、99EHY、102K、112STV、116V、119L、135T、136EKS、142EP、153D、154E、156G、157D、161EP、163V、178H、192V、194S、202E、204S、205D、206S、208HK、210V、212S、217GM、221LM、222A、225K、227R、232T、233AS、236A、237D、238D、241ALR、247T、249GP和258K;iv4V、29W、32D、36T、51T、77KM、80S、87A、90A、102K、112ST、116V、135T、136E、142P、153D、154E、161P、163V、192V、204S、210V、217G、221L、225K和227R;vK4、S23、F29、S32、N34、Q36、K44、S51、D65、S77、N80、G87、E90、P97、V98、A99、T102、G112、T116、F119、S135、P136、A142、S153、Q154、D156、S157、A161、K163、N178、L192、A194、D202、G204、N205、F206、V208、T210、P212、S217、S221、S222、S225、K227、S232、T233、T236、S237、T238、T241、A247、S249和G258;viK4、F29、S32、Q36、S51、S77、N80、G87、E90、T102、G112、T116、S135、P136、A142、S153、Q154、A161、K163、L192、G204、T210、S217、S221、S225和K227;viiK4V、S23L、F29W、S32DGY、N34D、Q36T、K44V、S51T、D65G、S77KM、N80S、G87A、E90A、P97S、V98GY、A99EHY、T102K、G112STV、T116V、F119L、S135T、P36EKS、A142EP、S153D、Q154E、D156G、S157D、A161EP、K163V、N178H、L192V、A194S、D202E、G204S、N205D、F206S、V208HK、T210V、P212S、S217GM、S221LM、S222A、S225K、K227R、S232T、T233AS、T236A、S237D、T238D、T241ALR、A247T、S249GP和G258K;或viiiK4V、F29W、S32D、Q36T、S51T、S77KM、N80S、G87A、E90A、T102K、G112ST、T116V、S135T、P136E、A142P、S153D、Q154E、A161P、K163V、L192V、G204S、T210V、S217G、S221L、S225K和K227R;其中所述变体具有内切葡聚糖酶活性,并且其中该变体或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQIDNO:1的氨基酸序列相对应来编号。在其他实施例中,本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段包含:i氨基酸序列,其对应于SEQIDNO:1的位置1-295,并且具有与SEQIDNO:1、70、71、72、73、74或者75的氨基酸序列至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;ii氨基酸序列,其对应于SEQIDNO:1的位置1-211,并且具有与如列于图2中的SEQIDNO:1、70、71、72、73、74或者75的位置1-211所示的氨基酸序列至少70%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;iii氨基酸序列,其对应于SEQIDNO:1的位置212-258,并且具有与如列于图3中的SEQIDNO:1、70、71、72、73、74或者75的位置212-258所示的氨基酸序列至少70%、75%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;和或iv氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置259-295,并且具有与如列于图4中的SEQIDNO:1、70、71、72、73、74或者75的位置259-295所示的氨基酸序列至少60%、67%、68%、70%、73%、75%、76%、80%、81%、83%、84%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性。在另一个实施例中,纤维素酶变体或其活性片段衍生自选自SEQIDNO:1、70、71、72、73、74、和75的亲本多肽或参比多肽。在仍又另一个实施例中,纤维素酶变体或其活性片段是GH45家族纤维素酶。在一个实施例中,该纤维素酶变体或其活性片段具有一种或多种改善的性质,所述一种或多种改善的性质选自改善的热稳定性、在一种或多种其他酶存在下的改善的稳定性和在一种或多种其他酶和一种或多种其他洗涤剂组分存在下的改善的稳定性。在另一个实施例中,所述其他酶是蛋白酶和或所述其他洗涤剂组分是表面活性剂。在一些实施例中,当与亲本多肽或参比多肽相比时,所述改善的性质得到改善。另外的实施例涉及包含所述纤维素酶变体或其活性片段的组合物;包含所述纤维素酶变体或其活性片段的载体和或宿主细胞;用于制备和或使用所述变体或其活性片段和或含有此类变体或其活性片段的所述组合物的方法;其中所述纤维素酶变体或其活性片段具有内切葡聚糖酶活性。本文所述的纤维素酶变体的特征使其非常适用于洗涤剂组合物、纺织品加工、纸张和纸浆加工以及其他工业应用,例如像,来赋予污垢释放或织物护理益处和或改善含棉织物的触感和或外观。为了清楚起见定义以下术语。未定义的术语应当符合本领域中所使用的常规含义。例如,本文未定义的技术和科学术语具有与普通技术人员通常理解的相同的含义参见,例如,Singleton和Sainsbury,DictionaryofMicrobiologyandMolecularBiology[微生物学和分子生物学词典],第2版,约翰·威利父子出版公司,纽约州1994;和Hale和Marham,哈伯科林斯生物学词典TheHarperCollinsDictionaryofBiology,哈珀永久出版社,纽约州1991。除非上下文另有明确指示,单数“一个一种”aan和“该所述”the包括复数引用。当与数值结合使用时,术语“约”是指数值的-10%至+10%的范围。例如,短语“约6的pH值”是指从5.4至6.6的pH值。当与洗涤剂或织物护理组合物结合使用时,术语“辅助成分”意指为所希望的特定类型的洗涤剂或织物护理组合物以及产品形式例如液体、颗粒状、粉末、棒状、糊状、片剂、凝胶、单位剂量、薄片或泡沫组合物选择的任何液体、固体或气体材料,这些材料还优选地与用于该组合物中的纤维素酶变体或其活性片段相容。在一些实施例中,颗粒状组合物处于“紧密”形式,而在其他实施例中,液体组合物处于“浓缩”形式。术语“纤维素酶变体”是指通过取代、添加或缺失一个或多个氨基酸衍生自亲本多肽或参比多肽的重组多肽。纤维素酶变体与亲本多肽可以相差少量的氨基酸残基并且可以通过它们与亲本多肽的一级氨基酸序列同源性同一性的水平来定义。例如,纤维素酶变体与亲本或参比多肽具有至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性。术语“突变”是指氨基酸序列中的任何变化或改变,包括用与起始氨基酸不同的氨基酸对氨基酸序列的鉴定位置处的氨基酸进行的取代、在氨基酸序列的鉴定位置处的氨基酸的缺失、在氨基酸序列的鉴定位置处的氨基酸的插入、在氨基酸序列中的氨基酸侧链的替换、和或氨基酸序列的化学修饰。术语“洗涤剂组合物”和“洗涤剂配制品”是指旨在用于洗涤介质用于清洁弄脏的物体中的化学成分的混合物。洗涤剂组合物配制品可以包括例如:一种或多种表面活性剂、水解酶、氧化还原酶、助洗剂、漂白剂、漂白活化剂、上蓝剂、荧光染料、结块抑制剂、遮蔽剂、酶活化剂、抗氧化剂、螯合剂、聚合物、泡沫调节剂、香料和增溶剂。术语“衍生自”涵盖术语“起源于”、“获得自”、“可获得自”、“分离自”和“产生自”,并且通常表示一种指定的材料在另一种指定的材料中找到其起源或具有可以参考另一种指定的材料来描述的特征。当与纤维素酶变体或其活性片段结合使用时,术语“有效量”是指在特定的应用或洗涤剂或织物护理组合物中实现所希望的内切葡聚糖酶活性水平所需要的纤维素酶变体或其活性片段的量。此类有效量由本领域的普通技术人员容易地确定的,并且是基于许多因素的,例如所使用的具体的纤维素酶变体或其活性片段、应用、清洁组合物的具体组成包括其中含有的特定蛋白酶、以及是否需要液体或干的例如颗粒状、棒状、粉末、固体、液体、片剂、凝胶、糊状、泡沫、薄片或单位剂量组合物。术语“内切葡聚糖酶”是指内切-1,4-1,3;1,4-β-D-葡聚糖4-葡聚糖水解酶E.C.3.2.1.4,其催化纤维素、纤维素衍生物如羧甲基纤维素和羟乙基纤维素、地衣多糖、混合的β-1,3葡聚糖如谷物β-D-葡聚糖或木葡聚糖中的β-1,4键、以及包含纤维素组分的其他植物材料中的1,4-β-D-糖苷键的内切水解。可以根据实例中描述的程序确定内切葡聚糖酶活性。术语“表达载体”是指包含编码特定多肽的DNA序列的DNA构建体,并且有效地连接到能够在适合的宿主中实现多肽表达的适合的控制序列。这样的控制序列包括影响转录的启动子,控制这种转录的任选的操纵子序列,编码适合的mRNA核糖体结合位点的序列,以及控制转录和翻译终止的序列。载体可以是质粒、噬菌体颗粒,或简单地是潜在的基因组插入物。一旦转化入适合的宿主中,载体可以独立于宿主基因组复制和起作用,或者在某些情况下可以整合入基因组本身。术语“织物”是指例如机织物、针织物和非机织材料,以及可以转化成例如纱线和机织物、针织物和非机织材料的短纤维和长丝。该术语涵盖从天然的以及合成的例如制造的纤维制成的材料。术语“织物护理组合物”或“织物护理配制品”是指当被添加到洗涤介质中时,将从织物上去除球粒和或绒毛;增亮织物颜色;和或软化织物的含有本文所述的纤维素酶变体或其活性片段的组合物配制品。术语“GH45家族”是指一种多肽,所述多肽根据以下文献被分类为糖苷水解酶家族45:HenrissatB.,1991,Aclassificationofglycosylhydrolasesbasedonamino-acidsequencesimilarities[基于氨基酸序列相似性对糖基水解酶进行分类],Biochem.J.[生物化学杂志]280:309-316,以及Henrissat和Bairoch,1996,Updatingthesequence-basedclassificationofglycosylhydrolases[更新基于序列的糖基水解酶分类],Biochem.J.[生物化学杂志]316:695-696,并且基于碳水化合物活性酶数据库Carbohydrate-ActiveenZYmesDatabase,CAZy,URL:http:afmb.cnrs-mrs.fr~cazyCAZYindex.html中的结构和功能关系CM进行分类。术语“宿主细胞”通常是指用本领域已知的重组DNA技术构建的载体转化或转染的原核或真核宿主。经转化的宿主细胞能够复制编码蛋白质变体的载体或表达所希望的蛋白质变体。在编码蛋白质变体预成型pre-form或形式pro-form的载体的情况下,当表达时,这些变体典型地从宿主细胞分泌到宿主细胞培养基中。术语“杂交”是指通过碱基配对将核酸链与互补链连接的过程,如本领域已知的。术语“杂交条件”是指进行杂交反应的条件。这些条件通常根据杂交在其下测量的条件的“严格”度来分类。严格度可以是基于例如结合复合物或探针的核酸的解链温度Tm。例如,“最大严格”典型地发生在约Tm-5℃低于探针的Tm5℃;“高严格”发生在低于Tm约5℃-10℃;“中等严格”发生在低于探针的Tm约10℃-20℃;并且“低严格”发生在低于Tm约20℃-25℃。可替代地,或另外地,杂交条件可以基于杂交的盐或离子强度条件,和或一次或多次严格洗涤,例如:6XSSC=非常低严格;3XSSC=低至中严格;1XSSC=中严格;以及0.5XSSC=高严格。在功能上,最大严格条件可以用于鉴定与杂交探针具有严格同一性或近乎严格同一性的核酸序列;而高严格条件用于鉴定与探针具有约80%或更高序列同一性的核酸序列。对于需要高选择性的应用,通常希望使用相对严格的条件来形成杂交例如,使用相对较低的盐和或高温条件。在将核酸序列插入细胞中的背景下,术语“引入”意指转化、转导或转染。转化手段包括本领域已知的原生质体转化、氯化钙沉淀、电穿孔、裸DNA等等。参见,Chang和Cohen[1979],Mol.Gen.Genet.[分子遗传学和普通遗传学]168:111-115;Smith等人,[1986],Appl.Env.Microbiol.[应用与环境微生物学]51:634;以及Ferrari等人在Harwood,Bacillus[芽孢杆菌属],普莱南出版公司,第57-72页,1989中的评论文章。当核酸或多核苷酸至少部分或完全地与其他组分包括但不限于例如其他蛋白质、核酸和细胞分离时,该核酸或多核苷酸是“分离的”。类似地,当多肽、蛋白质或肽至少部分或完全地与其他组分包括但不限于例如其他蛋白质、核酸和细胞分离时,该多肽、蛋白质或肽是“分离的”。以摩尔计,在组合物中分离的种类比其他种类更丰富。例如,分离的种类可以包含存在的所有大分子种类的至少约60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%以摩尔计。优选地,将目的种类纯化至基本均一性即,通过常规检测方法不能在组合物中检测到污染物种类。可以分别使用本领域熟知的许多技术例如核酸或蛋白质样品的琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳,接着通过染色后可视化来确定纯度和均一性。如果需要,可以使用高分辨率技术例如高效液相色谱法HPLC或类似方法来纯化物质。术语“其他洗涤剂组分”是指添加到洗涤剂组合物或配制品中的非酶组分,所述非酶组分例如表面活性剂、氧化还原酶、助洗剂、漂白剂、漂白活化剂、上蓝剂、荧光染料、结块抑制剂、遮蔽剂、酶活化剂、抗氧化剂、螯合剂、聚合物、泡沫调节剂、香料和增溶剂。术语“其他酶”是指添加到洗涤剂组合物中的第二、第三、第四等酶,其中第一酶是本文所述的纤维素酶变体或其活性片段。其他酶的实例包括,例如:酰基转移酶、淀粉酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、α-半乳糖苷酶、阿拉伯糖酶、阿拉伯糖苷酶、芳基酯酶、β-半乳糖苷酶、β-葡聚糖酶、角叉菜胶酶、过氧化氢酶、软骨素酶、角质酶、内切-β-甘露聚糖酶、外切-β-甘露聚糖酶、酯酶、外切-甘露聚糖酶、半乳聚糖酶、葡糖淀粉酶、半纤维素酶、透明质酸酶、角蛋白酶、漆酶、乳糖酶、木质素酶、脂肪酶、脂肪分解酶、脂加氧酶、甘露聚糖酶、金属蛋白酶、氧化酶、氧化还原酶、果胶酸裂合酶、果胶乙酰酯酶、果胶酶、戊聚糖酶、过水解酶、过氧化物酶、酚氧化酶、磷酸酶、磷脂酶、植酸酶、聚酯酶、聚半乳糖醛酸酶、蛋白酶、短梗霉多糖酶、还原酶、鼠李糖半乳糖醛酸酶、第二纤维素酶、β-葡聚糖酶、鞣酸酶、转谷氨酰胺酶、木聚糖乙酰酯酶、木聚糖酶、木糖苷酶,及其组合。术语“多核苷酸”涵盖能够编码多肽的DNA、RNA、异源双链体、以及合成分子。核酸可以是单链的或双链的,并且可以具有化学修饰。术语“核酸”和“多核苷酸”可互换地使用。由于遗传密码是简并的,可以使用多于一个密码子来编码特定的氨基酸,并且本发明的组合物和方法涵盖编码特定氨基酸序列的核苷酸序列。除非另有说明,核酸序列以5'至3'取向呈现。术语“多肽”是指包含通过肽键连接的多个氨基酸的分子。术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”可互换地使用。蛋白质可以任选地被修饰例如,糖基化、磷酸化、酰化、法尼基化、异戊二烯化和磺化以增加功能性。当此类氨基酸序列展现出活性时,它们可以被称为“酶”。使用针对氨基酸残基的常规单字母或三字母密码,采用标准氨基-至-羧基端取向即N→C表示的氨基酸序列。术语“重组”是指例如像通过以下被修饰以改变其序列或表达特征的遗传材料即核酸、它们编码的多肽、以及包含此类多核苷酸的载体和细胞:使编码序列突变以产生改变的多肽,将编码序列融合到另一基因的编码序列,将基因置于不同启动子的控制下,在异源生物体中表达基因,以降低或升高的水平表达基因,和以与其天然表达谱不同的方式有条件地或组成地表达基因。通常,基于此的重组核酸、多肽和细胞已被人为操纵,这样使得它们与自然界中发现的相关的核酸、多肽和或细胞不相同。术语“第二纤维素酶”是指添加到洗涤剂组合物中的第二纤维素酶,其中第一纤维素酶是本文所述的纤维素酶变体或其活性片段。该第二纤维素酶包括,例如,纤维二糖水解酶、内切葡聚糖酶、木葡聚糖酶及其组合。术语“信号序列”是指与多肽的N末端部分结合的并且促进成熟形式的蛋白质从细胞中分泌的氨基酸序列。细胞外蛋白质的成熟形式缺乏在分泌过程中被切除的信号序列。术语“表面活性剂”是指在本领域中通常被认为具有表面活性质量的任何化合物。表面活性剂可以包括例如阴离子、阳离子、非离子和两性离子化合物,其在本文中进一步描述。术语“热稳定性thermostability”和“热稳定的thermostable”是指在清洁、纺织品处理或其他过程期间盛行的条件下,例如当暴露于升高的温度时,暴露于升高的温度经给定的时间段之后,纤维素酶变体保留指定量的内切葡聚糖酶活性。在一些实施例中,在暴露于升高的温度例如至少约50℃、约55℃、约60℃、约65℃或约70℃经给定的时间段例如至少约10分钟、约30分钟、约60分钟、约120分钟、约180分钟、约240分钟、约300分钟等之后,一种或多种纤维素酶变体保留至少约50%、约60%、约70%、约75%、约80%、约85%、约90%、约92%、约95%、约96%、约97%、约98%或约99%的内切葡聚糖酶活性。术语“变体多核苷酸”是指编码纤维素酶变体、与亲本多核苷酸具有指定程度的同源性同一性或在严格条件下与亲本多核苷酸或其互补序列杂交的多核苷酸。例如,变体多核苷酸与亲本多核苷酸具有至少70%、75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的核苷酸序列同一性。关于多肽,术语“野生型”或“亲本”是指在一个或多个氨基酸位置处不包括人造的取代、插入或缺失的天然存在的多肽。相似地,关于多核苷酸,术语“野生型”或“亲本”是指在一个或多个核苷处不包括人造的取代、插入或缺失的天然存在的多核苷酸。然而,编码野生型或亲本多肽的多核苷酸不限于天然存在的多核苷酸,同时也涵盖编码野生型或亲本多肽的任何多核苷酸。术语“天然存在的”是指,例如,在自然界中发现的序列和其中含有的残基例如,多肽序列和其中含有的氨基酸,或核酸序列和其中含有的核酸。相反,术语“非天然存在的”是指,例如,没有在自然界中发现的序列和其中含有的残基例如,多肽序列和其中含有的氨基酸,或核酸序列和其中含有的核酸。关于多肽,术语“参比”是指在一个或多个氨基酸位置处不包括人造的取代、插入或缺失的天然存在的多肽,以及在一个或多个氨基酸位置处包括一个或多个人造的取代、插入或缺失的天然存在的或合成的多肽。相似地,关于多核苷酸,术语“参比”是指在一个或多个核苷处不包括人造的取代、插入或缺失的天然存在的多核苷酸,以及在一个或多个核苷处包括一个或多个人造的取代、插入或缺失的天然存在的或合成的多核苷酸。例如,编码野生型或亲本多肽的多核苷酸不限于天然存在的多核苷酸,并且涵盖编码野生型或亲本多肽的任何多核苷酸。本文所述的氨基酸取代使用一个或多个以下命名法:位置或起始氨基酸:位置:一个或多个取代的氨基酸。对仅一个位置的提及涵盖可以存在于参比多肽、亲本或野生型分子中在该位置处的任何起始氨基酸,以及此类起始氨基酸可以被其取代的任何氨基酸即,氨基酸取代排除了此类参比多肽、亲本或野生型分子的起始氨基酸。对经取代的氨基酸或起始氨基酸的提及可以进一步表示为由斜线“”分开的若干个经取代的氨基酸或若干个起始氨基酸。例如,X130AN-209-213代表三个氨基酸取代组合,其中X是在位置130处的可以被丙氨酸A或天冬酰胺N取代的任何起始氨基酸;209代表任何起始氨基酸可以被不是起始氨基酸的氨基酸取代的位置;并且213代表任何起始氨基酸可以被不是起始氨基酸的氨基酸取代的位置。通过另外的实例,EQS101FGHTV代表在位置101处的五个可能的取代,其中该起始氨基酸谷氨酸E、谷氨酰胺Q或丝氨酸S可以被苯丙氨酸F、甘氨酸G、组氨酸H、苏氨酸T或缬氨酸V取代。单字母代码“Z”标识亲本或参比氨基酸序列中的插入或缺失。对于相对于亲本或参比序列的插入,单字母密码“Z”位于位置编号的左侧并进一步包括在插入其中的每个氨基酸之前的数字例如,.01以指示插入的顺序。例如,在位置298处插入一个氨基酸谷氨酰胺Q,将被描述为“Z298.01Q”;在位置298处插入一个氨基酸X其中X可以是任何氨基酸,将被描绘为“Z298.01X”;并且在位置87与88之间插入三个氨基酸丙氨酸A、丝氨酸S和酪氨酸Y,将被描绘为“Z87.01AZ87.02SZ87.03Y”。对于缺失,单字母密码"Z"位于位置编号的右侧。例如,丙氨酸A从位置100的缺失将被描绘为A100Z。以上插入和缺失的一些的组合将被描绘为:“G87SZ87.01AZ87.02SZ87.03YA100Z”。可以使用已知的程序如BLAST、ALIGN和CLUSTAL使用标准参数确定序列同一性。参见,例如,Altschul等人,[1990]J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]215:403-410;Henikoff等人,[1989]Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]89:10915;Karin等人,[1993]Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]90:5873;和Higgins等人,[1988]Gene[基因]73:237-244。用于进行BLAST分析的软件可通过国家生物技术信息中心NationalCenterforBiotechnologyInformationNCBI公开获得。也可以使用FASTAPearson等人,[1988]Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]85:2444-2448来搜索数据库。两种多肽基本上相同的一个指示是第一多肽与第二多肽具有免疫交叉反应性。典型地,差别在于保守氨基酸取代的多肽具有免疫交叉反应性。因此,多肽与第二多肽实质上相同,例如,其中两个肽仅相差保守取代。另一个用于比较多个蛋白质序列的有用的算法是来自Geneious软件生物物质有限公司BiomattersLtd.的MUSCLE程序RobertC.Edgar,MUSCLE:Multisequencealignmentwithhighaccuracyandhighthroughput[MUSCLE:具有高精确度和高通量的多重序列比对],NucleicAcidsRes.[核酸研究]2004325:1792-1797。一个实施例涉及一种包含如下氨基酸序列的纤维素酶变体或其活性片段,所述氨基酸序列包含在对应于选自以下的SEQIDNO:1位置的两个或多个位置处的两个或更多个突变:i4、23、29、32、34、36、44、51、65、77、80、87、90、97、98、99、102、112、116、119、135、136、142、153、154、156、157、161、163、178、192、194、202、204、205、206、208、210、212、217、221、222、225、227、232、233、236、237、238、241、247、249、和258;ii4、29、32、36、51、77、80、87、90、102、112、116、135、136、142、153、154、161、163、192、204、210、217、221、225和227;iii4V、23L、29W、32DGY、34D、36T、44V、51T、65G、77KM、80S、87A、90A、97S、98GY、99EHY、102K、112STV、116V、119L、135T、136EKS、142EP、153D、154E、156G、157D、161EP、163V、178H、192V、194S、202E、204S、205D、206S、208HK、210V、212S、217GM、221LM、222A、225K、227R、232T、233AS、236A、237D、238D、241ALR、247T、249GP和258K;iv4V、29W、32D、36T、51T、77KM、80S、87A、90A、102K、112ST、116V、135T、136E、142P、153D、154E、161P、163V、192V、204S、210V、217G、221L、225K和227R;vK4、S23、F29、S32、N34、Q36、K44、S51、D65、S77、N80、G87、E90、P97、V98、A99、T102、G112、T116、F119、S135、P136、A142、S153、Q154、D156、S157、A161、K163、N178、L192、A194、D202、G204、N205、F206、V208、T210、P212、S217、S221、S222、S225、K227、S232、T233、T236、S237、T238、T241、A247、S249和G258;viK4、F29、S32、Q36、S51、S77、N80、G87、E90、T102、G112、T116、S135、P136、A142、S153、Q154、A161、K163、L192、G204、T210、S217、S221、S225和K227;viiK4V、S23L、F29W、S32DGY、N34D、Q36T、K44V、S51T、D65G、S77KM、N80S、G87A、E90A、P97S、V98GY、A99EHY、T102K、G112STV、T116V、F119L、S135T、P36EKS、A142EP、S153D、Q154E、D156G、S157D、A161EP、K163V、N178H、L192V、A194S、D202E、G204S、N205D、F206S、V208HK、T210V、P212S、S217GM、S221LM、S222A、S225K、K227R、S232T、T233AS、T236A、S237D、T238D、T241ALR、A247T、S249GP和G258K;或viiiK4V、F29W、S32D、Q36T、S51T、S77KM、N80S、G87A、E90A、T102K、G112ST、T116V、S135T、P136E、A142P、S153D、Q154E、A161P、K163V、L192V、G204S、T210V、S217G、S221L、S225K和K227R;其中所述变体具有内切葡聚糖酶活性,并且其中该变体或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQIDNO:1的氨基酸序列相对应来编号。另一个实施例涉及一种包含如下氨基酸序列的纤维素酶变体或其活性片段,所述氨基酸序列包含在对应于选自以下的SEQIDNO:1位置的两个或多个位置处的两个或更多个突变:i142+161、4+142、36+142、4+77、77+142、87+142、87+161、142+204、4+161、161+204、102+161、142+192、142+227、153+161、4+102、4+210、29+153、32+142、36+161、36+221、36+225、87+204、90+142、116+161、135+142、135+154、135+161、136+161、204+221、4V+80S、4+153、4+221、32+36、32+142、77+142、77+153、77+161、77+221、80+142、87+153、87+192、87+221、102+136、102+142、102+154、112+135、112+142、142+153、142+217、142+221、153+210、154+161、161+192和161+221;ii142P+161P、4V+142P、36T+142P、4V+77K、77K+142P、87A+142P、87A+161P、142P+204S、4V+161P、161P+204S、102K+161P、142P+192V、142P+227R、153D+161P、4V+102K、4V+210V、29W+153D、32D+142P、36T+161P、36T+221L、36T+225K、87A+204S、90A+142P、116V+161P、135T+142P、135T+154E、135T+161P、136E+161P、204S+221L、4V+80S、4V+153D、4V+221L、32D+36T、32Y+142P、77M+142P、77K+153D、77K+161P、77K+221L、80S+142P、87A+153D、87A+192V、87A+221L、102K+136E、102K+142P、102K+154E、112T+135T、112S+142P、142P+153D、142P+217G、142P+221L、153D+210V、154E+161P、161P+192V和161P+221L;或iiiA142P+A161P、K4V+A142P、Q36T+A142P、K4V+S77K、S77K+A142P、G87A+A142P、G87A+A161P、A142P+G204S、K4V+A161P、A161P+G204S、T102K+A161P、A142P+L192V、A142P+K227R、S153D+A161P、K4V+T102K、K4V+T210V、F29W+S153D、S32D+A142P、Q36T+A161P、Q36T+S221L、Q36T+S225K、G87A+G204S、E90A+A142P、T116V+A161P、S135T+A142P、S135T+Q154E、S135T+A161P、P136E+A161P、G204S+S221L、K4V+N80S、K4V+S153D、K4V+S221L、S32D+Q36T、S32Y+A142P、S77M+A142P、S77K+S153D、S77K+A161P、S77K+S221L、N80S+A142P、G87A+S153D、G87A+L192V、G87A+S221L、T102K+P136E、T102K+A142P、T102K+Q154E、G112T+S135T、G112S+A142P、A142P+S153D、A142P+S217G、A142P+S221L、S153D+T210V、Q154E+A161P、A161P+L192V和A161P+S221L;其中所述变体具有内切葡聚糖酶活性,并且其中该变体或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQIDNO:1的氨基酸序列相对应来编号。仍另外的实施例涉及一种包含如下氨基酸序列的纤维素酶变体或其活性片段,所述氨基酸序列包含在对应于选自以下的SEQIDNO:1位置的两个或多个位置处的两个或更多个突变:K4V-Q36T-S77M-T102K-Q154E-N178H-S225K-S232Z-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z、K4V-K44V-S77K-E90A-S135T-A142P-Q154E-L192V-V208H-S221L-S232Z-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z-A247T、K4V-N80S-G87A-Q154E-A161P-G204S-S221L-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z、S32Y-T102K-A142P-G204S-V208H-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z-A247T、K4V-K44V-S77K-N80S-T102K-G112T-S135T-A142P-L192V-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z、S77M-A142P-K163V-V208H-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z-A247T、S77M-G87A-A99H-G112T-A142P-S232T-T233Z-T236A、S23L-A142P-D202E-S232T-T233Z、Q36T-S77K-G87A-A142P-S153D-A161P-G204S-S221L-S237D、K4V-F29W-S77K-T102K-P136E-S153D-A161P-T210V、A99Y-G112T-S135T-S153D-K227R、S23L-S32Y-G112T-A142P-A161P-G204S-S217G-K227R-S237D、F29W-Q36T-K44V-T116V-S135T-Q154E-A161P-S217G-S221L-S225K-T238D、K4V-Q36T-S77K-N80S-A142P-L192V-G204S-T210V-S221L、F29W-G87A-E90A-A99Y-A142P-S153D-K227R-S237D、K4V-S77M-Q154E-A161P-L192V-V208H-S217G-T233A-S237D、E90A-G112T-S135T-A161P-G204S、S51T-S77M-P136E-K163V-G204S-T210V-K227R、K4V-F29W-S51T-T116V-S135T-S221L-S225K、S77M-T102K-T116V-S135T-S153D-A161P-T238D、K4V-S23L-S32Y-N80S-T102K-A142P-A161P-S237D、K44V-G87A-Q154E-A161P、S32Y-A142P-Q154E-K163V-S217G-K227R-T233A、N34D-S51T-G87A-T102K-T116V-P136E-Q154E-A161P-L192V-T233A-T238D、K4V-S77K-E90A-A142P-S157D-G214Z-S217G-T233A-T238D、K4V-Q36T-S51T-N80S-S135T-S157D-T233A、K4V-S51T-V98G-S135T-Q154E-T233A、T102K-A142P-Q154E-G204S-K227R、S51T-G87A-A99Y-S135T-N205D-T238D、G87A-A142P-A161P-L192V-G204S-T241A、K4V-S77K-E90A-A142P-S157D-S217G-T233A-T238D、K4V-P136E-S153D-A161P-T210V-K227R、S51T-N80S-A142P-L192V-V208H、K4V-S23L-Q36T-S77M-G112T-S157D-A161P-L192V-S221L、Q36T-V98Y-A142P-A161E-S225K、Q36T-P136E-A142P-S225K-S249P、A99Y-P136E-A142P-A161E-S221L、S32D-Q36T-S221L-S225K、S32D-A99Y-A142P-A161E-S249P、K44V-A142P-A161P-K163V、S32D-Q36T-G112S-A142P、S32D-Q36T-S77M-S135T-A142P-A161P、F29W-S77M-A99E-A142P、G112S-P136K-A142E、S135T-A142P-K163V、K4V-G112S-S135T-A142P-A161P、S32D-Q36T-A99E-P136K-A142P、G112S-P136K-A142P-S217M-S221M-T241L-G258K、K4V-S77K-G112S-A142P-A194S-S249G-G258K、P97S-G112V-P136S-A142P-A161E-K163V-P212S-S222A、P97S-G112V-P136S-S153D-A161E-S225K-T241R、P97S-G112V-P136S-S153D-S225K-T241R、S32D-A142E-V208K-S225K-T241R、S32D-A142E、S51T-A99Y-F119L-P136E-Q154E-D156G-S217G、K44V-A142P-A161P-K163V-K227R-T236A、G112T-S135T-Q154E-T233S-Z233.01T-Z233.02T-Z233.03S-Z233.04T-Z233.05S-Z233.06T-S237D、Q36T-S51T-V98G-T116V-A142P-A161P-T233S-Z233.01T-Z233.02A-Z233.03S-Z233.04T-Z233.05K-Z233.06A-Z233.07T-Z233.08S-Z233.09T-Z233.10T、Q36T-S77K-G87A-A142P-S153D-A161P-D177Z-G204S-S221L-S237D、K4V-F29W-S51T-D65G-S77M-T116V-S153D-K163V-G204S-F206S-T210V-S221L-Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04S-Z233.05T-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T、S77M-S135T-Q154E-K163V-K227R-Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04S-Z233.05D-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T-S237D、K4V-S32G-Q36T-S77M-G87A-T116V-A142P-A161P-Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04D-Z233.05T-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T、和S77M-G87A-P136E-S157D-S221L-Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04S-Z233.05T-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T-T236A-T238D-K286E;其中所述变体具有内切葡聚糖酶活性,并且其中该变体或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQIDNO:1的氨基酸序列相对应来编号。在另外的实施例中,本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段进一步包含选自以下的一个或多个突变:i在对应于位置213和257之间的任何SEQIDNO:1位置的一个或多个位置处的一个或多个氨基酸残基的缺失;ii在对应于选自以下的SEQIDNO:1位置的一个或多个位置处的一个或多个氨基酸残基的缺失:D177、S232、T233、S234、T235、T236、S237、T238、K239、A240、T241、S242和T243;iii在对应于选自以下的SEQIDNO:1位置的一个或多个位置处的一个或多个氨基酸残基的缺失:D177、S232、T233、S234、T235、T236、S237、T238、K239、A240、T241、S242和T243,其中所述缺失选自D177Z、T233Z、T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z和S232Z-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z;iv在对应于SEQIDNO:1的位置233的位置之后一个、两个、三个、四个、五个、六个或更多个氨基酸残基的插入;v在对应于SEQIDNO:1的位置233的位置之后一个、两个、三个、四个、五个、六个或更多个氨基酸残基的插入,其中所述插入选自Z233.01T-Z233.02T-Z233.03S-Z233.04T-Z233.05S-Z233.06T、Z233.01T-Z233.02A-Z233.03S-Z233.04T-Z233.05K-Z233.06A-Z233.07T-Z233.08S-Z233.09T-Z233.10T、Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04S-Z233.05D-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T、Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04D-Z233.05T-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T和Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04S-Z233.05T-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T;和vi,一个i至v的组合;其中所述变体具有内切葡聚糖酶活性,并且其中该变体或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQIDNO:1的氨基酸序列相对应来编号。甚至仍另外的实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,条件是所述突变中的一个或多个是非天然存在的。甚至仍又另外的实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体包含:i氨基酸序列,其对应于SEQIDNO:1的位置1-295,并且具有与SEQIDNO:1、70、71、72、73、74或者75的氨基酸序列至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;ii氨基酸序列,其对应于SEQIDNO:1的位置1-211,并且具有与如列于图2中的SEQIDNO:1、70、71、72、73、74或者75的位置1-211所示的氨基酸序列至少70%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;iii氨基酸序列,其对应于SEQIDNO:1的位置212-258,并且具有与如列于图3中的SEQIDNO:1、70、71、72、73、74或者75的位置212-258所示的氨基酸序列至少70%、75%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;iv氨基酸序列,其对应于SEQIDNO:1的位置259-295,并且具有与如列于图4中的SEQIDNO:1、70、71、72、73、74或者75的位置259-295所示的氨基酸序列至少60%、67%、68%、70%、73%、75%、76%、80%、81%、83%、84%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;或v一个i至iv的组合。又另一个实施例中涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体包含:i一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-295,并且具有与SEQIDNO:1的氨基酸序列至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;ii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-211,并且具有与如列于图2中的SEQIDNO:1的位置1-211所示的氨基酸序列至少70%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%,89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;iii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置212-258,并且具有与SEQIDNO:1的位置212-258所示的氨基酸序列至少70%、75%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;iv一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置259-295,并且具有与如列于图4中的SEQIDNO:1的位置259-295所示的氨基酸序列至少60%、67%、68%、70%、73%、75%、76%、80%、81%、83%、84%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;或v一个i至iv的组合。甚至另外的实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体包含:i一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-295,并且具有与SEQIDNO:70的氨基酸序列至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;ii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-211,并且具有与如列于图2中的SEQIDNO:70的位置1-211所示的氨基酸序列至少70%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%,89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;iii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置212-258,并且具有与如列于图3中的SEQIDNO:70的位置212-258所示的氨基酸序列至少70%、75%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;iv一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置259-295,并且具有与如列于图4中的SEQIDNO:70的位置259-295所示的氨基酸序列至少60%、67%、68%、70%、73%、75%、76%、80%、81%、83%、84%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;或v一个i至iv的组合。另一个实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体包含:i一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-295,并且具有与SEQIDNO:71的氨基酸序列至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;ii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-211,并且具有与如列于图2中的SEQIDNO:71的位置1-211所示的氨基酸序列至少70%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%,89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;iii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置212-258,并且具有与如列于图3中的SEQIDNO:71的位置212-258所示的氨基酸序列至少70%、75%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;iv一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置259-295,并且具有与如列于图4中的SEQIDNO:71的位置259-295所示的氨基酸序列至少60%、67%、68%、70%、73%、75%、76%、80%、81%、83%、84%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;或v一个i至iv的组合。仍另一个实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体包含:i一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-295,并且具有与SEQIDNO:72的氨基酸序列至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;ii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-211,并且具有与如列于图2中的SEQIDNO:72的位置1-211所示的氨基酸序列至少70%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%,89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;iii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置212-258,并且具有与如列于图3中的SEQIDNO:72的位置212-258所示的氨基酸序列至少70%、75%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;iv一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置259-295,并且具有与如列于图4中的SEQIDNO:72的位置259-295所示的氨基酸序列至少60%、67%、68%、70%、73%、75%、76%、80%、81%、83%、84%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;或v一个i至iv的组合。又另一个实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体包含:i一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-295,并且具有与SEQIDNO:73的氨基酸序列至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;ii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-211,并且具有与如列于图2中的SEQIDNO:73的位置1-211所示的氨基酸序列至少70%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%,89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;iii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置212-258,并且具有与如列于图3中的SEQIDNO:73的位置212-258所示的氨基酸序列至少70%、75%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;iv一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置259-295,并且具有与如列于图4中的SEQIDNO:73的位置259-295所示的氨基酸序列至少60%、67%、68%、70%、73%、75%、76%、80%、81%、83%、84%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;或v一个i至iv的组合。又甚至仍另外的实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体包含:i一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-295,并且具有与SEQIDNO:74的氨基酸序列至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;ii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-211,并且具有与如列于图2中的SEQIDNO:74的位置1-211所示的氨基酸序列至少70%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%,89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;iii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置212-258,并且具有与如列于图3中的SEQIDNO:74的位置212-258所示的氨基酸序列至少70%、75%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;iv一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置259-295,并且具有与如列于图4中的SEQIDNO:74的位置259-295所示的氨基酸序列至少60%、67%、68%、70%、73%、75%、76%、80%、81%、83%、84%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;或v一个i至iv的组合。甚至仍另外的实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体包含:i一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-295,并且具有与SEQIDNO:75的氨基酸序列至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;ii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置1-211,并且具有与如列于图2中的SEQIDNO:75的位置1-211所示的氨基酸序列至少70%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%,89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;iii一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置212-258,并且具有与如列于图3中的SEQIDNO:75的位置212-258所示的氨基酸序列至少70%、75%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;iv一个氨基酸序列,对应于SEQIDNO:1的位置259-295,并且具有与如列于图4中的SEQIDNO:75的位置259-295所示的氨基酸序列至少60%、67%、68%、70%、73%、75%、76%、80%、81%、83%、84%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;或v一个i至iv的组合。另一个另外的实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体衍生自选自SEQIDNO:1、70、71、72、73、74和75的亲本多肽或参比多肽。另一个仍另外的实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体衍生自SEQIDNO:1的亲本多肽或参比多肽。仍另一个实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体衍生自SEQIDNO:70的亲本多肽或参比多肽。另外的实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体衍生自SEQIDNO:71的亲本多肽或参比多肽。仍另外的实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体衍生自SEQIDNO:72的亲本多肽或参比多肽。另一个实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体衍生自SEQIDNO:73的亲本多肽或参比多肽。又另一个实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体衍生自SEQIDNO:74的亲本多肽或参比多肽。又仍另一个实施例涉及本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体衍生自SEQIDNO:75的亲本多肽或参比多肽。在另外的实施例中,本文所述的纤维素酶变体或其活性片段具有一种或多种改善的性质,所述一种或多种改善的性质选自改善的热稳定性、在一种或多种其他酶存在下的改善的稳定性和在一种或多种其他酶和一种或多种其他洗涤剂组分存在下的改善的稳定性。在另一个实施例中,所述其他酶是蛋白酶和或所述其他洗涤剂组分是表面活性剂。在一些实施例中,当与亲本多肽或参比多肽相比时,所述改善的性质得到改善。在另一个实施例中,改善的性质是改善的热稳定性,并且变体或其活性片段的热的性能指数PI大于1,或者≥1.1。仍然有在其他实施例中,该改善的性质是在一种或多种蛋白酶存在下改善的稳定性,并且在所述蛋白酶存在时测定所述变体或其活性片段,所述变体或其活性片段具有大于1,或≥1.1、1.2、1.3、1.4、1.5或2.0的PI。甚至在另外的实施例中,该改善的性质是在一种或多种蛋白酶和一种或多种其他洗涤剂组分存在下的改善的稳定性,并且其中当在所述蛋白酶和所述其他洗涤剂组分存在下测试所述变体或其活性片段的稳定性时,所述变体或其活性片段具有大于1、或≥1.1、1.5、2.0或2.5的PI。在又另外的实施例中,PI根据实例1的纤维素酶活性测定进行测量。在一个实施例中,本文所述的纤维素酶变体或其活性片段是GH45家族纤维素酶。在一些实施例中,本文所述的纤维素酶变体或其活性片段是分离的。另外的实施例涉及编码本文所述的纤维素酶变体或其活性片段的多核苷酸。在一个实施例中,该多核苷酸包含在表达载体中,该表达载体包含在异源生物体中。该多核苷酸可以有效地连接至调控元件例如,启动子、终止子和增强子以辅助表达本文所述的编码的纤维素酶变体或其活性片段。在一些实施例中,本文所述的纤维素酶变体或其活性片段在异源生物中表达为分泌的多肽,在这种情况下,组合物和方法涵盖用于在异源生物体中将变体或其活性片段表达为分泌多肽的方法。编码本文所述的纤维素酶变体或其活性片段的DNA可以从公开的序列化学合成或直接从具有该基因的宿主细胞例如通过cDNA文库筛选或PCR扩增中获得。另外的实施例涉及生产本文所述的纤维素酶变体或其活性片段的方法,这些方法包括:用包含编码纤维素酶变体或其活性片段的多核苷酸的表达载体稳定地转化宿主细胞;在适合的条件下培养该经转化的宿主细胞,以产生纤维素酶变体或其活性片段;和回收该纤维素酶变体或其活性片段。在其他实施例中,将本文所述的纤维素酶变体或其活性片段融合至信号肽用于指导变体或其活性片段的胞外分泌。例如,在某些实施例中,信号肽是本文所述的纤维素酶变体或其活性片段的天然信号肽。在其他实施例中,信号肽是非天然信号肽,例如枯草芽孢杆菌AprE信号肽。在一些实施例中,宿主细胞,其中本文所述的纤维素酶变体或其活性片段在异源生物体即除了是大孢圆孢霉属Staphylotrichum物种之外的生物体中表达。示例性异源生物体包括例如:枯草芽孢杆菌B.subtilis、地衣芽孢杆菌B.licheniformis、迟缓芽孢杆菌B.lentus、短芽孢杆菌B.brevis、嗜热脂肪土芽孢杆菌Geobacillus先前为芽孢杆菌属stearothermophilus、嗜碱芽孢杆菌B.alkalophilus、解淀粉芽孢杆菌B.amyloliquefaciens、凝结芽孢杆菌B.coagulans、环状芽孢杆菌B.circulans、灿烂芽胞杆菌B.lautus、巨大芽孢杆菌B.megaterium、苏云金芽孢杆菌B.thuringiensis、变铅青链霉菌S.lividans、鼠灰链霉菌S.murinus、荧光假单孢菌P.fluorescens、施氏假单胞菌P.stutzerei、奇异变形杆菌P.mirabilis、富养罗尔斯通菌R.eutropha、肉葡萄球菌S.carnosus、乳酸乳球菌L.lactis、大肠杆菌E.coli、酵母例如像酵母菌属物种Saccharomycesspp.或裂殖酵母属物种Schizosaccharomycesspp.,例如酿酒酵母S.cerevisiae,卢克诺文思金孢子菌C.lucknowense和丝状真菌例如曲霉属物种Aspergillusspp.,例如米曲霉A.oryzae或黑曲霉A.niger、灰腐质霉H.grisea、特异腐质霉和里氏木霉T.reesei.。用于将核酸转化到这些生物体中的方法是本领域熟知的。用于转化曲霉属宿主细胞的适合的程序描述于例如EP238023中。用于转化木霉属宿主细胞的适合的程序描述于例如Steiger等人,2011,Appl.Environ.Microbiol.[应用与环境微生物学]77:114-121。在一些实施例中,将多核苷酸密码子优化用于在不同宿主中表达,突变以引入克隆位点,或另外改变以添加功能性。在一些实施例中,表达载体可以在异源宿主细胞中提供,该异源宿主细胞适合用于表达本文所述的纤维素酶变体或其活性片段或者适合用于在将该表达载体引入适合的宿主细胞之前繁殖该表达载体。在一些实施例中,通过标准分子克隆技术将多核苷酸包含在表达盒中和或克隆到适合的表达载体中。此类表达盒或载体含有辅助转录起始和终止的序列例如启动子和终止子,并且通常含有可选择标记。在一些实施例中,编码纤维素酶变体或其活性片段的多核苷酸在特定的杂交条件下与编码本文所述的变体中的一个或多个的多核苷酸或其互补序列杂交。术语“杂交”是指通过碱基配对将核酸链与互补链连接的过程,如本领域已知的。术语“杂交条件”是指进行杂交反应的条件。这些条件通常根据杂交在其下测量的条件的“严格”度来分类。严格度可以是基于例如结合复合物或探针的核酸的解链温度Tm。例如,“最大严格”典型地发生在约Tm-5℃低于探针的Tm5℃;“高严格”发生在低于Tm约5℃-10℃;“中等严格”发生在低于探针的Tm约10℃-20℃;并且“低严格”发生在低于Tm约20℃-25℃。可替代地,或另外地,杂交条件可以基于杂交的盐或离子强度条件,和或一次或多次严格洗涤,例如:6XSSC=非常低严格;3XSSC=低至中严格;1XSSC=中严格;以及0.5XSSC=高严格。在功能上,最大严格条件可以用于鉴定与杂交探针具有严格同一性或近乎严格同一性的核酸序列;而高严格条件用于鉴定与探针具有约80%或更高序列同一性的核酸序列。对于需要高选择性的应用,通常希望使用相对严格的条件来形成杂交例如,使用相对较低的盐和或高温条件。另外的实施例涉及包含本文所述的一种或多种纤维素酶变体或其活性片段的组合物。在另一个实施例中,该组合物选自酶组合物、洗涤剂组合物和织物护理组合物。在一些实施例中,该组合物是酶组合物。在其他实施例中,所述组合物是洗涤剂组合物。在仍其他实施例中,该组合物是织物护理组合物。在又其他实施例中,该洗涤剂组合物是衣物洗涤剂。在仍其他实施例中,该衣物洗涤剂选自重垢液体HDL衣物洗涤剂和重垢干洗HDD颗粒状衣物洗涤剂。在一些另外的实施例中,该组合物呈选自以下的形式:粉末、液体、颗粒状、棒状、固体、半固体、凝胶、糊状、乳剂、片剂、胶囊、单位剂量、薄片和泡沫。在甚至另外的实施例中,该组合物呈选自以下的形式:液体、粉末、颗粒状固体、片剂、薄片和单位剂量形式。在一些实施例中,本文所述的组合物以单位剂量形式提供,包括片剂、胶囊、药袋、小袋、薄片和多室袋。在一些实施例中,单位剂型被设计成在多隔室小袋或其他单位剂型内提供对成分的控制释放。适合的单位剂量和控释形式是本领域已知的参见例如EP2100949、EP2100947、WO02102955、WO04111178、WO2013165725、以及US4,765,916和4,972,017。在一些实施例中,单位剂量形式由用水溶性膜或水溶性小袋包裹的片剂提供。在又甚至另外的实施例中,该组合物含有磷酸盐或不含磷酸盐和或含有硼或不含硼。在仍其他实施例中,该组合物含有磷酸盐。在又仍其他实施例中,该组合物不含磷酸盐。在甚至仍另外的实施例中,该组合物含有硼。在又甚至仍另外的实施例中,该组合物不含硼。另外在其他实施例中,该组合物进一步包含i一种或多种其他酶,该一种或多种其他酶选自:酰基转移酶、淀粉酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、α-半乳糖苷酶、阿拉伯糖酶、阿拉伯糖苷酶、芳基酯酶、β-半乳糖苷酶、β-葡聚糖酶、角叉菜胶酶、过氧化氢酶、软骨素酶、角质酶、内切β-甘露聚糖酶、外切β-甘露聚糖酶、酯酶、外切甘露聚糖酶、半乳聚糖酶、葡糖淀粉酶、半纤维素酶、透明质酸酶、角蛋白酶、漆酶、乳糖酶、木质素酶、脂肪酶、脂肪分解酶、脂加氧酶、甘露聚糖酶、金属蛋白酶、氧化酶、氧化还原酶、果胶酸裂合酶、果胶乙酰酯酶、果胶酶、戊聚糖酶、过水解酶、过氧化物酶、酚氧化酶、磷酸酶、磷脂酶、植酸酶、聚酯酶、聚半乳糖醛酸酶、蛋白酶、短梗霉多糖酶、还原酶、鼠李糖半乳糖醛酸酶、第二纤维素酶、β-葡聚糖酶、鞣酸酶、转谷氨酰胺酶、木聚糖乙酰酯酶、木聚糖酶和木糖苷酶;ii一种或多种表面活性剂;iii选自钙和锌的一种或多种离子;iv一种或多种辅助成分;v一种或多种稳定剂;vi从约0.001%至约5.0重量%的本文所述的纤维素酶变体或其活性片段;vii一种或多种漂白剂;或viii其组合。在仍另外的实施例中,该组合物包含一种或多种其他酶。在又仍另外的实施例中,该一种或多种其他酶选自:酰基转移酶、淀粉酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、α-半乳糖苷酶、阿拉伯糖酶、阿拉伯糖苷酶、芳基酯酶、β-半乳糖苷酶、β-葡聚糖酶、角叉菜胶酶、过氧化氢酶、软骨素酶、角质酶、内切β-甘露聚糖酶、外切β-甘露聚糖酶、酯酶、外切甘露聚糖酶、半乳聚糖酶、葡糖淀粉酶、半纤维素酶、透明质酸酶、角蛋白酶、漆酶、乳糖酶、木质素酶、脂肪酶、脂肪分解酶、脂加氧酶、甘露聚糖酶、金属蛋白酶、氧化酶、氧化还原酶、果胶酸裂合酶、果胶乙酰酯酶、果胶酶、戊聚糖酶、过水解酶、过氧化物酶、酚氧化酶、磷酸酶、磷脂酶、植酸酶、聚半乳糖醛酸酶、聚酯酶、蛋白酶、短梗霉多糖酶、还原酶、鼠李糖半乳糖醛酸酶、第二纤维素酶、β-葡聚糖酶、鞣酸酶、转谷氨酰胺酶、木聚糖乙酰酯酶、木聚糖酶和木糖苷酶。在另外的实施例中,本文所述的组合物进一步包含蛋白酶、甘露聚糖酶和或淀粉酶。在一些实施例中,该组合物进一步包含一种或多种表面活性剂。在一些其他实施例中,该表面活性剂选自非离子、两性的、半极性、阴离子、阳离子、两性离子及其组合和混合物。在又仍其他实施例中,该表面活性剂选自阴离子、阳离子、非离子和两性离子化合物。在一些实施例中,该组合物包含按组合物的重量计从约0.1%至约60%、约1%至约50%或约5%至约40%的表面活性剂。示例性表面活性剂包括但不限于十二烷基苯磺酸钠、C12-14链烷醇聚醚-7、C12-15链烷醇聚醚-7、C12-15链烷醇聚醚硫酸钠、C14-15链烷醇聚醚-4、月桂醇醚硫酸钠例如SteolCS-370、氢化椰油酸钠、C12乙氧基化物Alfonic1012-6、HetoxolLA7、HetoxolLA4、烷基苯磺酸钠例如Nacconol90G、及其组合和混合物。阴离子表面活性剂包括但不限于直链烷基苯磺酸盐LAS、α-烯烃磺酸盐AOS、烷基硫酸盐脂肪醇硫酸盐AS、醇乙氧基硫酸盐AEOS或AES、仲链烷磺酸盐SAS、α-磺基脂肪酸甲酯、烷基-或烯基琥珀酸、或皂。非离子表面活性剂包括但不限于醇乙氧基化物AEO或AE、羧化醇乙氧基化物、壬基苯酚乙氧基化物、烷基多糖苷、烷基二甲基胺氧化物、乙氧基化脂肪酸单乙醇酰胺、脂肪酸单乙醇酰胺或多羟基烷基脂肪酸酰胺例如,如WO9206154中所述、脂肪酸的聚氧乙烯酯、聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯例如,TWEEN、聚氧乙烯醇、聚氧乙烯异醇、聚氧乙烯醚例如,TRITON和BRIJ、聚氧乙烯酯、聚氧乙烯-对-叔辛基苯酚或辛基苯基-环氧乙烷缩合物例如,NONIDETP40、环氧乙烷与脂肪醇的缩合物例如,LUBROL、聚氧乙烯壬基酚、聚亚烷基二醇SYNPERONICF108、糖基表面活性剂例如吡喃葡萄糖苷、硫代吡喃葡萄糖苷、及其组合和混合物。在另外的实施例中,本文公开的洗涤剂组合物进一步包含表面活性剂混合物,包括但不限于5%-15%阴离子表面活性剂、1表明与亲本多肽或参比多肽相比,变体的性能得到改善,而PI为1PI=1鉴定出与亲本多肽或参比多肽具有相同性能的变体,并且PI小于1PI1鉴定出性能不如亲本多肽或参比多肽的变体。例如,如SEQIDNO:1列出的STCE1野生型STCE1-WT成熟蛋白质是亲本。蛋白质测定分析A280使用SpectraMax读板仪分子仪器公司MolecularDevices,美国测量微量滴定板Costar3635,西格玛奥德里奇公司SigmaAldrich,美国中纯化的酶样品在280nm处的吸光度。使用STCE1-WT标准品在50ppm至1000ppm的范围内的标准蛋白质的响应绘制标准曲线。然后从这些图中插入变体样品的吸光度值。蛋白质测定分析HPLC对于高分辨率浓度确定,对蛋白质样品进行高效液相色谱法HPLC方法。使用配备有ZorbaxC-3柱的安捷伦1290UHPLC进行蛋白质定量。使用在水中的0.1%三氟乙酸TFA和在乙腈中的0.07%TFA的梯度从柱洗脱样品。在220nm处测量吸光度,并使用ChemStation软件安捷伦科技公司AgilentTechnologies,美国对峰进行积分。基于纯化的STCE1-WT成熟蛋白SEQIDNO:1的标准曲线来计算样品的蛋白质浓度。使用PAHBAH试剂的纤维素酶活性测定使用4-羟基苯甲酸酰肼PAHBAH试剂在羧甲基纤维素CMC底物上测试纤维素酶的活性。该酶活性基于CMC底物水解成还原糖,然后通过PAHBAH试剂检测新的还原末端。将试剂PAHBAH储备溶液西格玛奥德里奇公司SigmaAldrich,美国制备为在0.5N盐酸HCL中的5%溶液。将PAHBAH试剂在0.5M氢氧化钠NaOH中以1:4的比例进一步稀释,以占据最终的1%溶液。在50mMHEPES缓冲溶液pH8.2中制备1%CMC底物。将调节至pH8.2的酶样品6μL品添加到含有40μL的1%CMC溶液的微量滴定板MTP中,并在40℃下在iEMSTM微孔板培养箱摇床HT赛默飞世尔科技公司ThermoFisherScientificInc,美国中孵育15min;然后将8μl酶-底物混合物转移到每孔含有20μl的1%PAHBAH的新MTP中,并在95℃下在热循环仪EppendorfTMMastercyclerTMproPCR系统,赛默飞世尔科技公司ThermoFisherScientific,美国中孵育5min。最后,将20μl的每种反应溶液转移至新鲜MTP中,并使用SpectraMax读板仪在410nm下测量吸光度。纤维素酶稳定性测定如表1所示,纤维素酶样品在以下三种稳定性条件下测试:热稳定性、在蛋白酶存在下的稳定性、以及在洗涤剂和蛋白酶存在下的稳定性。使用上文描述的纤维素酶活性测定测量应激和非应激纤维素酶活性,并且使用应激活性与非应激活性的比率确定残留酶活性。用于测定的蛋白酶是可商购的BPN’-Y217L枯草杆菌蛋白酶,其作为SEQIDNO:2列出。在稳定性测定中使用可商购的洗涤剂之前,通过在设定为100℃的水浴中加热洗涤剂2小时来使洗涤剂中含有的酶灭活。*联合利华商业上销售的重垢液体衣物洗涤剂对于非应激测试条件,在测定活性之前不孵育测试样品。对于应激测试条件,将测试样品在96孔PCRMTP板中制备、密封,并在升高的温度和表1中利用以下描述的条件进行孵育:EppendorfTM384MasterCyclerTMPro热循环仪,以测量热稳定性、以及在蛋白酶存在下的稳定性,或iEMS培养箱,以测量在洗涤剂和蛋白酶存在下的稳定性。在不同孵育期后,测定样品的纤维素酶活性。将在每次测定中测试的酶样品的残余活性计算为减去空白的三次重复的平均值。将每种酶样品的相对残余活性计算为残余活性与非应激活性之间的比率。通过将相对残余活性数目乘以100来计算相对残余活性百分比。将每种STCE1-WT变体的PI计算为变体的相对残余活性与STCE1-WT纤维素酶的相对残余活性之间的比率。实例2不同GH45纤维素酶及其变体的表达选择编码STCE1-WT纤维素酶的基因先前在以下出版物中被描述为家族45糖苷水解酶:Koga,J.,Y.Baba,A.Shimonaka,T.Nishimura,S.Hanamura和T.Kono2008,“Purificationandcharacterizationofanewfamily45endoglucanase,STCE1,fromStaphylotrichumcoccosporumanditsoverproductioninHumicolainsolens[来自大孢圆孢霉的新家族45内切葡聚糖酶STCE1的纯化和表征,及其在特异腐质霉中的过量生产]”Appl.Environ.Microbiol.[应用与环境微生物学]7413:4210-4217作为用于产生亲本纤维素酶及其变体的模板。编码野生型WT形式的蛋白本文也称为亲本的stce1基因含有编码DNA内的内含子。通过使用以下可以去除内含子:i具有如SEQIDNO:3所示序列的正向引物;ii具有如SEQIDNO:4所示序列的反向引物;以及iiiIIXL定点诱变试剂盒安捷伦科技公司AgilentTechnologies,美国。使用标准试剂将所得产物亚克隆到表达载体pTTT-pyr2中。除了构巢曲霉A.nidulanspyrG基因被红褐肉座菌H.jecorinapyr2基因替代,pTTTpyr2载体类似于先前描述例如,在WO2011153449A1中的pTTTpyrG载体。pTTT-pyr2表达载体含有里氏木霉cbhI衍生的启动子cbhI和cbhI终止子区域允许感兴趣的基因的强诱导型表达、构巢曲霉amdS和pyr2选择性标记赋予转化体在作为唯一氮源的乙酰胺上的生长和里氏木霉端粒区域允许在真菌细胞中非染色体质粒维持。含有stce1-WT纤维素酶基因SEQIDNO:5所示的pTTT-pyr2pTTT-pyr2-stce1基的载体的图显示在图1中。使用本领域已知的分子生物学技术,将多个氨基酸突变取代、插入、和或缺失引入stce1基因编码区。产生编码这些STCE-1变体的另外的表达载体,以pTTT-pyr2-stce1平台为基础。通过描述于美国专利号8,679,792中,用编码每种所需基因的质粒,基于PEG的方案转化适合的里氏木霉宿主菌株的原生质体。在转化体生长后,将来自每个孔的孢子合并,并使用含有乙酰胺作为唯一氮源的基本培养基重新修补。在孢子形成后,将孢子收获并用于接种于亚琛培养基中。将培养物在28℃、80%湿度和50mm振荡甩动下,在Multitron摇床培养箱Infors,瑞士中孵育6天。过滤培养液,以收集澄清的上清液作为目的样品,测定实施前于-20℃储存。在pTTT-pyr2-STCE1载体中的stce1-WT基因的核苷酸序列如SEQIDNO:5951个碱基对所示。stce1-WT基因的翻译产物的氨基酸序列如SEQIDNO:6316个氨基酸所示,其中N-末端21个氨基酸构成信号肽。STCE1-WT蛋白质的成熟形式的氨基酸序列如SEQIDNO:1295个氨基酸所示,其中C-末端37个氨基构成碳水化合物结合模块CBM。本文测试的STCE1-WT变体纤维素酶的突变取代、插入、和或缺失列出在表2中,具有SEQIDNO:7-69所示的每一个变体的相关氨基酸序列,其中每个变体的氨基酸位置通过与SEQIDNO:1的氨基酸序列相对应来编号。将STCE1-WT和变体纤维素酶蛋白质通过硫酸铵沉淀,以1:1稀释度添加3MNH42SO4至澄清的培养肉汤,并使用在20mMKH2PO4pH6.0中的RelisorbOC400树脂Resindon,意大利进行纯化。用20mMKH2PO4pH6.0+0.5MNH42SO4缓冲液洗涤树脂,并将目的蛋白质在20mMKH2PO4pH6.0缓冲液中洗脱并4℃储存直至测定。实例3STCE1纤维素酶变体的稳定性如表1列出的STCE1-WT和STCE1变体纤维素酶的活性测定如实施例1中所述,在pH8.2下,在CMC底物上进行。纤维素酶变体对比STCE1-WT纤维素酶的相对活性为至少50%,对所述的纤维素酶变体在实施例1所述的测试条件下进行进一步研究来测量稳定性,包括:热稳定性、在蛋白酶存在下的稳定性、以及在蛋白酶和洗涤剂存在下的稳定性。相对稳定性性能结果如表2所示,以STCE1纤维素酶变体对比STCE1-WT的PI的形式报告。以下取代:142P、161P、4V、36T、87A、154E、135T、204S、77K、102K、77M、153D、221L、32D、136E、192V、227R、29W、90A、112T、116V、217G、225K、51T、80S、112S、163V、210V在具有改善的稳定性的STCE1纤维素酶变体中被高频率地观察到表2。这些结果表明,通过这些氨基酸取代引入稳定性益处。此外,以下取代组被高频率地观察到:142P+161P、4V+142P、36T+142P、4V+77K、77K+142P、87A+142P、87A+161P、142P+204S、4V+161P、161P+204S、102K+161P、142P+192V、142P+227R、153D+161P、4V+102K、4V+210V、29W+153D、32D+142P、36T+161P、36T+221L、36T+225K、87A+204S、90A+142P、116V+161P、135T+142P、135T+154E、135T+161P、136E+161P、204S+221L、4V+80S、4V+153D、4V+221L、32D+36T、32Y+142P、77M+142P、77K+153D、77K+161P、77K+221L、80S+142P、87A+153D、87A+192V、87A+221L、102K+136E、102K+142P、102K+154E、112T+135T、112S+142P、142P+153D、142P+217G、142P+221L、153D+210V、154E+161P、161P+192V和161P+221L。实例4GH45纤维素酶与STCE1变体的比对生成以下纤维素酶的氨基酸序列的比对:STCE1-WTSEQIDNO:1,嗜热毛壳菌NCBI登录号:AGY80101.1,残基1-293SEQIDNO:70,特异腐质霉NCBI登录号:CAA01574.1,残基22-305SEQIDNO:71,灰腐质霉NCBI登录号:BAA74956.1,残基22-305SEQIDNO:72,太瑞斯梭孢壳霉NCBI登录号:XP_003651003.1,残基22-299SEQIDNO:73,嗜热支顶孢登录号:ACE10216;SEQIDNO:6inUSPN7361487,残基22-315SEQIDNO:74,粗糙脉孢菌NCBI登录号:XP_957107,残基22-293SEQIDNO:75,以及如表1SEQIDNO:7-68列出的纤维素酶变体。使用来自Geneious软件生物物质有限公司BiomattersLtd.的MUSCLE程序使用默认参数来比对这些序列RobertC.Edgar,MUSCLE:multiplesequencealignmentwithhighaccuracyandhighthroughput[MUSCLE:具有高精确度和高通量的多序列比对],Nucl.AcidsRes.[核酸研究]2004325:1792-1797。基于GH45纤维素酶的先前的结构功能分析,例如特异腐质霉纤维素酶的晶体结构pdbID3ENG,包含催化核心、接头和C-末端的区域由如图2A-2H所示的催化核心区域、如图3A-3B所示的接头区域和如图4A-4B所示的C-末端区域定义。催化核心含有对应于SEQIDNO:1所示的成熟STCE1-WT纤维素酶的位置1-211的残基,其中氨基酸位置通过与SEQIDNO:1的氨基酸序列相对应来编号。在这个催化核心区域的残基比对如图2A-2H所示。残基P212、S213、G258和C259跨越所有研究的纤维素酶是完全保守的,并且跨越已检查的GH45纤维素酶序列锚定不同长度的一个高度可变区。因此,接头区域含有对应于SEQIDNO:1所示的成熟STCE1-WT纤维素酶的P212和G258的残基之间存在的残基,其中氨基酸位置通过与SEQIDNO:1的氨基酸序列相对应来编号。在这个接头区域内的残基比对如图3A-3B所示。对于本项研究中评估的蛋白,接头的长度范围为从19-55个氨基酸,该接头存在于:对应于SEQIDNO:1所示的成熟STCE1-WT纤维素酶的位置212和258的残基之间其中氨基酸位置通过与SEQIDNO:1的氨基酸序列相对应来编号,其中STCE1-WT接头含有44个残基并且全部研究的纤维素酶接头的平均长度是40。C-末端区域含有的残基存在于:对应于SEQIDNO:1所示的成熟STCE1-WT纤维素酶的位置259和295的残基之间,其中氨基酸位置通过与SEQIDNO:1的氨基酸序列相对应来编号。在这个C-末端区域内的比对如图4A-4B所示。

权利要求:1.一种包含如下氨基酸序列的纤维素酶变体或其活性片段,所述氨基酸序列包含在对应于选自以下的SEQIDNO:1位置的两个或更多个位置处的两个或更多个突变:i4、23、29、32、34、36、44、51、65、77、80、87、90、97、98、99、102、112、116、119、135、136、142、153、154、156、157、161、163、178、192、194、202、204、205、206、208、210、212、217、221、222、225、227、232、233、236、237、238、241、247、249、和258;ii4、29、32、36、51、77、80、87、90、102、112、116、135、136、142、153、154、161、163、192、204、210、217、221、225和227;iii4V、23L、29W、32DGY、34D、36T、44V、51T、65G、77KM、80S、87A、90A、97S、98GY、99EHY、102K、112STV、116V、119L、135T、136EKS、142EP、153D、154E、156G、157D、161EP、163V、178H、192V、194S、202E、204S、205D、206S、208HK、210V、212S、217GM、221LM、222A、225K、227R、232T、233AS、236A、237D、238D、241ALR、247T、249GP和258K;iv4V、29W、32D、36T、51T、77KM、80S、87A、90A、102K、112ST、116V、135T、136E、142P、153D、154E、161P、163V、192V、204S、210V、217G、221L、225K和227R;vK4、S23、F29、S32、N34、Q36、K44、S51、D65、S77、N80、G87、E90、P97、V98、A99、T102、G112、T116、F119、S135、P136、A142、S153、Q154、D156、S157、A161、K163、N178、L192、A194、D202、G204、N205、F206、V208、T210、P212、S217、S221、S222、S225、K227、S232、T233、T236、S237、T238、T241、A247、S249和G258;viK4、F29、S32、Q36、S51、S77、N80、G87、E90、T102、G112、T116、S135、P136、A142、S153、Q154、A161、K163、L192、G204、T210、S217、S221、S225和K227;viiK4V、S23L、F29W、S32DGY、N34D、Q36T、K44V、S51T、D65G、S77KM、N80S、G87A、E90A、P97S、V98GY、A99EHY、T102K、G112STV、T116V、F119L、S135T、P36EKS、A142EP、S153D、Q154E、D156G、S157D、A161EP、K163V、N178H、L192V、A194S、D202E、G204S、N205D、F206S、V208HK、T210V、P212S、S217GM、S221LM、S222A、S225K、K227R、S232T、T233AS、T236A、S237D、T238D、T241ALR、A247T、S249GP和G258K;或viiiK4V、F29W、S32D、Q36T、S51T、S77KM、N80S、G87A、E90A、T102K、G112ST、T116V、S135T、P136E、A142P、S153D、Q154E、A161P、K163V、L192V、G204S、T210V、S217G、S221L、S225K和K227R;其中所述变体具有内切葡聚糖酶活性,并且其中该变体或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQIDNO:1的氨基酸序列相对应来编号。2.如权利要求1所述的纤维素酶变体或其活性片段,其中在对应于两个或更多个SEQIDNO:1位置的所述两个或更多个位置处的两个或更多个突变选自:i142+161、4+142、36+142、4+77、77+142、87+142、87+161、142+204、4+161、161+204、102+161、142+192、142+227、153+161、4+102、4+210、29+153、32+142、36+161、36+221、36+225、87+204、90+142、116+161、135+142、135+154、135+161、136+161、204+221、4V+80S、4+153、4+221、32+36、32+142、77+142、77+153、77+161、77+221、80+142、87+153、87+192、87+221、102+136、102+142、102+154、112+135、112+142、142+153、142+217、142+221、153+210、154+161、161+192和161+221;ii142P+161P、4V+142P、36T+142P、4V+77K、77K+142P、87A+142P、87A+161P、142P+204S、4V+161P、161P+204S、102K+161P、142P+192V、142P+227R、153D+161P、4V+102K、4V+210V、29W+153D、32D+142P、36T+161P、36T+221L、36T+225K、87A+204S、90A+142P、116V+161P、135T+142P、135T+154E、135T+161P、136E+161P、204S+221L、4V+80S、4V+153D、4V+221L、32D+36T、32Y+142P、77M+142P、77K+153D、77K+161P、77K+221L、80S+142P、87A+153D、87A+192V、87A+221L、102K+136E、102K+142P、102K+154E、112T+135T、112S+142P、142P+153D、142P+217G、142P+221L、153D+210V、154E+161P、161P+192V和161P+221L;或iiiA142P+A161P、K4V+A142P、Q36T+A142P、K4V+S77K、S77K+A142P、G87A+A142P、G87A+A161P、A142P+G204S、K4V+A161P、A161P+G204S、T102K+A161P、A142P+L192V、A142P+K227R、S153D+A161P、K4V+T102K、K4V+T210V、F29W+S153D、S32D+A142P、Q36T+A161P、Q36T+S221L、Q36T+S225K、G87A+G204S、E90A+A142P、T116V+A161P、S135T+A142P、S135T+Q154E、S135T+A161P、P136E+A161P、G204S+S221L、K4V+N80S、K4V+S153D、K4V+S221L、S32D+Q36T、S32Y+A142P、S77M+A142P、S77K+S153D、S77K+A161P、S77K+S221L、N80S+A142P、G87A+S153D、G87A+L192V、G87A+S221L、T102K+P136E、T102K+A142P、T102K+Q154E、G112T+S135T、G112S+A142P、A142P+S153D、A142P+S217G、A142P+S221L、S153D+T210V、Q154E+A161P、A161P+L192V和A161P+S221L。3.如权利要求1或2所述的纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体进一步包含选自以下的一个或多个突变:i在对应于位置213和257之间的任何SEQIDNO:1位置的一个或多个位置处的一个或多个氨基酸残基的缺失;ii在对应于选自以下的SEQIDNO:1位置的一个或多个位置处的一个或多个氨基酸残基的缺失:D177、S232、T233、S234、T235、T236、S237、T238、K239、A240、T241、S242和T243;iii在对应于选自以下的SEQIDNO:1位置的一个或多个位置处的一个或多个氨基酸残基的缺失:D177、S232、T233、S234、T235、T236、S237、T238、K239、A240、T241、S242和T243,其中所述缺失选自D177Z、T233Z、T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z和S232Z-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z;iv在对应于SEQIDNO:1的位置233的位置之后一个、两个、三个、四个、五个、六个或更多个氨基酸残基的插入;v在对应于SEQIDNO:1的位置233的位置之后一个、两个、三个、四个、五个、六个或更多个氨基酸残基的插入,其中所述插入选自Z233.01T-Z233.02T-Z233.03S-Z233.04T-Z233.05S-Z233.06T、Z233.01T-Z233.02A-Z233.03S-Z233.04T-Z233.05K-Z233.06A-Z233.07T-Z233.08S-Z233.09T-Z233.10T、Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04S-Z233.05D-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T、Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04D-Z233.05T-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T和Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04S-Z233.05T-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T;以及vii至iv的组合。4.如任一前述权利要求所述的纤维素酶变体或其活性片段,其中在对应于两个或更多个SEQIDNO:1位置的所述两个或更多个位置处的两个或更多个突变选自:K4V-Q36T-S77M-T102K-Q154E-N178H-S225K-S232Z-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z、K4V-K44V-S77K-E90A-S135T-A142P-Q154E-L192V-V208H-S221L-S232Z-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z-A247T、K4V-N80S-G87A-Q154E-A161P-G204S-S221L-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z、S32Y-T102K-A142P-G204S-V208H-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z-A247T、K4V-K44V-S77K-N80S-T102K-G112T-S135T-A142P-L192V-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z、S77M-A142P-K163V-V208H-T233Z-S234Z-T235Z-T236Z-S237Z-T238Z-K239Z-A240Z-T241Z-S242Z-T243Z-A247T、S77M-G87A-A99H-G112T-A142P-S232T-T233Z-T236A、S23L-A142P-D202E-S232T-T233Z、Q36T-S77K-G87A-A142P-S153D-A161P-G204S-S221L-S237D、K4V-F29W-S77K-T102K-P136E-S153D-A161P-T210V、A99Y-G112T-S135T-S153D-K227R、S23L-S32Y-G112T-A142P-A161P-G204S-S217G-K227R-S237D、F29W-Q36T-K44V-T116V-S135T-Q154E-A161P-S217G-S221L-S225K-T238D、K4V-Q36T-S77K-N80S-A142P-L192V-G204S-T210V-S221L、F29W-G87A-E90A-A99Y-A142P-S153D-K227R-S237D、K4V-S77M-Q154E-A161P-L192V-V208H-S217G-T233A-S237D、E90A-G112T-S135T-A161P-G204S、S51T-S77M-P136E-K163V-G204S-T210V-K227R、K4V-F29W-S51T-T116V-S135T-S221L-S225K、S77M-T102K-T116V-S135T-S153D-A161P-T238D、K4V-S23L-S32Y-N80S-T102K-A142P-A161P-S237D、K44V-G87A-Q154E-A161P、S32Y-A142P-Q154E-K163V-S217G-K227R-T233A、N34D-S51T-G87A-T102K-T116V-P136E-Q154E-A161P-L192V-T233A-T238D、K4V-S77K-E90A-A142P-S157D-G214Z-S217G-T233A-T238D、K4V-Q36T-S51T-N80S-S135T-S157D-T233A、K4V-S51T-V98G-S135T-Q154E-T233A、T102K-A142P-Q154E-G204S-K227R、S51T-G87A-A99Y-S135T-N205D-T238D、G87A-A142P-A161P-L192V-G204S-T241A、K4V-S77K-E90A-A142P-S157D-S217G-T233A-T238D、K4V-P136E-S153D-A161P-T210V-K227R、S51T-N80S-A142P-L192V-V208H、K4V-S23L-Q36T-S77M-G112T-S157D-A161P-L192V-S221L、Q36T-V98Y-A142P-A161E-S225K、Q36T-P136E-A142P-S225K-S249P、A99Y-P136E-A142P-A161E-S221L、S32D-Q36T-S221L-S225K、S32D-A99Y-A142P-A161E-S249P、K44V-A142P-A161P-K163V、S32D-Q36T-G112S-A142P、S32D-Q36T-S77M-S135T-A142P-A161P、F29W-S77M-A99E-A142P、G112S-P136K-A142E、S135T-A142P-K163V、K4V-G112S-S135T-A142P-A161P、S32D-Q36T-A99E-P136K-A142P、G112S-P136K-A142P-S217M-S221M-T241L-G258K、K4V-S77K-G112S-A142P-A194S-S249G-G258K、P97S-G112V-P136S-A142P-A161E-K163V-P212S-S222A、P97S-G112V-P136S-S153D-A161E-S225K-T241R、P97S-G112V-P136S-S153D-S225K-T241R、S32D-A142E-V208K-S225K-T241R、S32D-A142E、S51T-A99Y-F119L-P136E-Q154E-D156G-S217G、K44V-A142P-A161P-K163V-K227R-T236A、G112T-S135T-Q154E-T233S-Z233.01T-Z233.02T-Z233.03S-Z233.04T-Z233.05S-Z233.06T-S237D、Q36T-S51T-V98G-T116V-A142P-A161P-T233S-Z233.01T-Z233.02A-Z233.03S-Z233.04T-Z233.05K-Z233.06A-Z233.07T-Z233.08S-Z233.09T-Z233.10T、Q36T-S77K-G87A-A142P-S153D-A161P-D177Z-G204S-S221L-S237D、K4V-F29W-S51T-D65G-S77M-T116V-S153D-K163V-G204S-F206S-T210V-S221L-Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04S-Z233.05T-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T、S77M-S135T-Q154E-K163V-K227R-Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04S-Z233.05D-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T-S237D、K4V-S32G-Q36T-S77M-G87A-T116V-A142P-A161P-Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04D-Z233.05T-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T和S77M-G87A-P136E-S157D-S221L-Z233.01S-Z233.02T-Z233.03T-Z233.04S-Z233.05T-Z233.06K-Z233.07A-Z233.08T-Z233.09S-Z233.10T-Z233.11T-T236A-T238D-K286E。5.如任一前述权利要求所述的纤维素酶变体或其活性片段,条件是所述突变中的一个或多个是非天然存在的。6.如任一前述权利要求所述的纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体包含i氨基酸序列,其对应于SEQIDNO:1的位置1-295,并且具有与SEQIDNO:1、70、71、72、73、74或者75的氨基酸序列至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;ii氨基酸序列,其对应于SEQIDNO:1的位置1-211,并且具有与如列于图2中的SEQIDNO:1、70、71、72、73、74或者75的位置1-211所示的氨基酸序列至少70%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或小于100%的氨基酸序列同一性;iii氨基酸序列,其对应于SEQIDNO:1的位置212-258,并且具有与如列于图3中的SEQIDNO:1、70、71、72、73、74或者75的位置212-258所示的氨基酸序列至少70%、75%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;iv氨基酸序列,其对应于SEQIDNO:1的位置259-295,并且具有与如列于图4中的SEQIDNO:1、70、71、72、73、74或者75的位置259-295所示的氨基酸序列至少60%、67%、68%、70%、73%、75%、76%、80%、81%、83%、84%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的氨基酸序列同一性;或vi至iv的组合。7.如任一前述权利要求所述的纤维素酶变体或其活性片段,其中当与亲本多肽或参比多肽比较时,所述变体具有至少一种改善的性质,所述至少一种改善的性质选自改善的热稳定性、在一种或多种蛋白酶存在下的稳定性、和在一种或多种蛋白酶和一种或多种其他洗涤剂组分存在下的稳定性。8.如任一前述权利要求所述的纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体衍生自选自SEQIDNO:1、70、71、72、73、74和75的亲本多肽或参比多肽。9.如任一前述权利要求所述的纤维素酶变体或其活性片段,其中所述改善的性质是i改善的热稳定性,并且其中所述变体或其活性片段具有大于1或≥1.1的热PI;ii在一种或多种蛋白酶存在下的改善的稳定性,并且其中当在所述蛋白酶存在下测试所述变体或其活性片段的稳定性时,所述变体或其活性片段具有大于1或≥1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、或2.0的PI;和或iii在一种或多种蛋白酶和一种或多种其他洗涤剂组分存在下的改善的稳定性,并且其中当在所述蛋白酶和所述其他洗涤剂组分存在下测试所述变体或其活性片段的稳定性时,所述变体或其活性片段具有大于1或≥1.1、1.5、2.0、或2.5的PI。10.如权利要求9所述的纤维素酶变体或其活性片段,其中所述PI根据实例1的纤维素酶活性测定进行测量。11.如权利要求9或10所述的纤维素酶变体或其活性片段,其中所述其他洗涤剂组分是表面活性剂。12.如任一前述权利要求所述的纤维素酶变体或其活性片段,其中所述变体或其活性片段是GH45家族纤维素酶。13.一种组合物,所述组合物包含如任一前述权利要求所述的纤维素酶变体或其活性片段。14.如权利要求13所述的组合物,其中所述组合物选自酶组合物、洗涤剂组合物和织物护理组合物。15.如权利要求13或14所述的组合物,所述组合物进一步包含i一种或多种其他酶,所述一种或多种其他酶选自:酰基转移酶、淀粉酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、α-半乳糖苷酶、阿拉伯糖酶、阿拉伯糖苷酶、芳基酯酶、β-半乳糖苷酶、β-葡聚糖酶、角叉菜胶酶、过氧化氢酶、软骨素酶、角质酶、内切β-甘露聚糖酶、外切β-甘露聚糖酶、酯酶、外切甘露聚糖酶、半乳聚糖酶、葡糖淀粉酶、半纤维素酶、透明质酸酶、角蛋白酶、漆酶、乳糖酶、木质素酶、脂肪酶、脂肪分解酶、脂加氧酶、甘露聚糖酶、金属蛋白酶、氧化酶、氧化还原酶、果胶酸裂合酶、果胶乙酰酯酶、果胶酶、戊聚糖酶、过水解酶、过氧化物酶、酚氧化酶、磷酸酶、磷脂酶、植酸酶、聚酯酶、聚半乳糖醛酸酶、蛋白酶、短梗霉多糖酶、还原酶、鼠李糖半乳糖醛酸酶、第二纤维素酶、β-葡聚糖酶、鞣酸酶、转谷氨酰胺酶、木聚糖乙酰酯酶、木聚糖酶和木糖苷酶;ii一种或多种表面活性剂;iii选自钙和锌的一种或多种离子;iv一种或多种辅助成分;v一种或多种稳定剂;vi从约0.001%至约5.0重量%的如权利要求1-15中任一项所述的纤维素酶变体或其活性片段;vii一种或多种漂白剂;和或viii其组合。16.如权利要求13-15中任一项所述的组合物,其中所述组合物是衣物洗涤剂。17.如权利要求13-16中任一项所述的组合物,其中所述组合物呈选自以下的形式:液体、粉末、颗粒状固体、片剂、薄片和单位剂量形式。18.如权利要求13-17中任一项所述的组合物,其中所述组合物含有磷酸盐或不含磷酸盐和或含有硼或不含硼。19.一种多核苷酸,所述多核苷酸包含编码如权利要求1-12中任一项所述的纤维素酶变体或其活性片段的核酸序列。20.一种表达载体,所述表达载体包含如权利要求19所述的多核苷酸。21.一种宿主细胞,所述宿主细胞包含如权利要求20所述的表达载体。22.一种用于生产如权利要求1-12中任一项所述的纤维素酶变体或其活性片段的方法,所述方法包括:a用如权利要求20所述的表达载体稳定地转化如权利要求21所述的宿主细胞;b在适合于所述宿主细胞产生所述纤维素酶变体或其活性片段的条件下培养所述经转化的宿主细胞;和c回收所述纤维素酶变体或其活性片段。23.如权利要求1-12中任一项的纤维素酶变体或其活性片段在酶组合物、洗涤剂组合物、织物护理组合物、纺织品整理加工或纸张和纸浆加工中的用途。

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