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申请/专利权人:澳门大学;中国科学院深圳先进技术研究院
摘要:本发明属于多糖质量控制技术领域,具体涉及一种基于拟杆菌多糖利用谱的中药多糖质量控制方法。本发明所述方法通过测定拟杆菌对多糖的利用,实现多糖的质量控制。该方法不仅可以区分不同来源和制备方法的多糖,还可以提供潜在的药效学和机理信息。此外,不同的多糖可以引起拟杆菌种的差异生长,从中可以发现多糖的益生元可以改善拟杆菌种的生长,具有潜在的商业价值。
主权项:1.一种基于拟杆菌多糖利用谱的多糖质量控制方法,包括如下步骤:将拟杆菌门菌种接种至含有多糖的mBMM培养基中进行厌氧培养,每12~24h测量一次拟杆菌的细胞密度,得到多个时间点的拟杆菌细胞密度,所述细胞密度以OD600值计;以所述多个时间点拟杆菌细胞密度的数据构建拟杆菌多糖利用谱;依据所述拟杆菌多糖利用谱进行多糖质量的判定,所述判定包括:若两种或多种多糖的拟杆菌多糖利用谱的相似性越高,两种或多种多糖的单糖组成越相似;依据拟杆菌多糖利用谱确认拟杆菌与多糖的相关性,实现多糖的质量控制;所述mBMM培养基每1L水中溶解有以下组分:50mL矿物3B溶液、2.0gNaHCO3、1.0gL-半胱氨酸盐酸盐、1.5mL浓度为2.78mgmL的FeSO4·7H2O溶液、1.0mL浓度为5mgmL的氯化血红素溶液、100μL浓度为5mgmL的维生素K3溶液、100μL浓度为0.05mgmL的维生素B12溶液、20mgL-蛋氨酸和31mg组氨酸;所述矿物3B溶液每100mL水溶解以下组分:1.8gKH2PO4、1.8gNaCl、40mgMgCl2·6H2O、39mgCaCl2、2mgCoCl2·6H2O、20mgMnCl2·4H2O、1gNH4Cl和500mgNa2SO4。
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