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申请/专利权人：郑州凌思生物科技有限责任公司

摘要：本发明公开了一种胶体金‑PS微球复合微球，包括表面官能化的胶体金纳米微球与表面能化的PS微球，胶体金纳米微球与PS微球之间的表面官能团共价偶联组装成复合微球，其中胶体金纳米微球位于PS微球的表面。本发明还公开了胶体金‑PS微球复合微球的制备方法，包括以下步骤：对胶体金纳米微球表面进行附膜保护；对附膜保护地胶体金纳米微球进行表面官能化修饰；对PS微球表面官能化修饰；表面官能化地胶体金纳米微球和PS微球共价偶联组装成复合微球。本发明提供的胶体金‑PS微球复合微球作为侧向层析主要固相载体，既能解决PS微球离心难的问题，又能保留胶体金的显色特性且不易造成脱色，同时也能解决胶体金稳定性差、灵敏度低的问题。

主权项：1.胶体金-PS微球复合微球，其特征是，包括表面官能化的胶体金纳米微球与表面官能化的PS微球，所述胶体金纳米微球与PS微球之间的表面官能团共价偶联组装成复合微球，其中所述胶体金纳米微球位于PS微球的表面；所述表面官能化的胶体金纳米微球为氨基化的胶体金纳米微球，其表面官能团来自γ-氨丙基甲基二乙氧基硅烷；所述表面官能化的PS微球为羧基化的PS微球；其通过以下制备而成：1取500μl200OD40nm粒径的胶体金溶液，加入质量体积比为50％的PVP水溶液10-100μl，混匀后静置反应15分钟；加入含3-5％TEOS的乙醇溶液100μl，混匀后加入5μl氨水，震荡反应24小时；用无水乙醇10000g离心清洗4次，10min次，超声分散至500μl乙醇中备用；2将包硅后的胶体金逐滴加入1％的γ-氨丙基甲基二乙氧基硅烷乙醇溶液30-60μl，室温搅拌24小时；离心弃去上清，用无水乙醇10000g离心清洗4次，10min次，超声分散，最后用纯化水复溶得到氨基化胶体金纳米微球；3室温下，取100ml纯化水、100mgSDS、9ml重蒸苯乙烯加入三口瓶中，以200rpm机械搅拌，并通氮气30分钟，加热升温至75℃，加入1ml30mgml的KPS水溶液，保持氮气气氛，聚合反应8h，得到PS种子微球；取100ml纯化水、100mgSDS、10ml所述PS种子微球、5ml苯乙烯单体加入三口瓶中，以200rpm机械搅拌，并通氮气30分钟，加入1ml30mgml的KPS水溶液升温至75℃，反应3h，取500ul的丙烯酸加入三口瓶中，继续反应10h，待反应结束后，关闭加热使之冷却至室温，将乳胶球溶液10000g离心20min并去除上清，用无水乙醇清洗2-3次，最后用纯化水复溶，即得羧基化PS微球；4取所述羧基化PS微球3mg，用25mM氯化钠溶液洗涤2-3次后重新分散于300μl25mM氯化钠中，取氨基化胶体金纳米微球8mg，分散于300ul25mM氯化钠中，将所述步骤1中所得PS微球逐滴加入到所述步骤2中所得到的胶体金溶液中，随即在混匀仪上旋转反应30分钟；旋转反应结束后向反应体系中加入EDCNHS各10mg，EDCNHS用25mM氯化钠作溶剂，继续在混匀仪上反应4h，反应结束后进行离心分离，5000g，10分钟，用乙醇反复清洗2-3次，最终得到胶体金-PS微球复合微球。

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