申请/专利权人：四川百诺吉科技有限公司

申请日：2020-04-14

公开（公告）日：2023-11-21

公开（公告）号：CN111518768B

主分类号：C12N5/09

分类号：C12N5/09

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.11.21#授权;2020.09.04#实质审查的生效;2020.08.11#公开

摘要：本发明提供了一种适用于LMH细胞贴壁培养的低血清培养基及其制备方法，属于生物制品领域，该培养基包括延胡索酸、琥珀酸盐、甜菜碱、半胱胺、右旋糖酐、磷酸吡哆醛、β‑巯基乙酸、吡啶甲酸铬、肉碱盐酸盐、力肽、硒代甲硫氨酸等物质。本发明制备的一种适用于LMH细胞贴壁培养的低血清培养基成分明确、无蛋白组分、无动物来源组分、血清用量低2％‑3％、病毒产量高，用于制备禽腺病毒滴度可达109TCID50ml，用于培养LMH细胞，细胞生长均匀，不会聚团生长。

主权项：1.一种低血清培养基在LMH细胞贴壁培养中的应用，其特征在于，所述低血清培养基包括组分一或组分二；其中，组分一包括如下组分：草酰乙酸100碳酸氢钠1850无水磷酸二氢钠3500氯化钙125氯化钠3800氯化钾500磷酸二氢钾50无水硫酸镁100L盐酸精氨酸300L天冬氨酸30L天冬酰胺100L胱氨酸二盐酸盐50L谷氨酸5L亮氨酸10L异亮氨酸52L甲硫氨酸63L苯丙氨酸20L丝氨酸50L苏氨酸60L色氨酸30L缬氨酸80甘氨酸46L谷氨酰胺200肉碱盐酸盐20葡萄糖9000果糖3.3葡萄糖酸钙20视黄醇4.5碘化钾0.05维生素D38柠檬酸10琥珀酸盐5β-胡萝卜素0.02力肽950右旋糖酐4.5β-巯基乙酸10吐温8015烟酰胺5维生素E6抗坏血酸11生物素0.005氯化胆碱20乙醇胺7七水硫酸亚铁30六水合氯化镁160丙酮酸钠30丁酸钠59亚油酸0.03亚麻酸1硫酸铜10硫酸铁0.05盐酸吡哆醇1.5氢化可的松1.5地塞米松5D-泛酸钙1硫酸钴20硝酸钾0.6肌醇100酚红15孕酮0.005磷酸二氢钙5谷胱甘肽20丙酮酸120葡萄糖酸锰0.05亚硒酸钠0.06延胡索酸1甜菜碱11半胱胺0.05核黄素2.2磷酸吡哆醛5吡啶甲酸铬5硒代甲硫氨酸0.001；其中，组分二包括如下组分：草酰乙酸500碳酸氢钠2800无水磷酸二氢钠2250氯化钙210氯化钠4200氯化钾350磷酸二氢钾10无水硫酸镁20L盐酸精氨酸150L天冬氨酸50L天冬酰胺30L胱氨酸二盐酸盐20L谷氨酸12L亮氨酸48L异亮氨酸100L甲硫氨酸5L苯丙氨酸44L丝氨酸10L苏氨酸10L色氨酸5L缬氨酸120甘氨酸80L谷氨酰胺300肉碱盐酸盐1葡萄糖1500果糖0.5葡萄糖酸钙2视黄醇10碘化钾2.8维生素D35柠檬酸65琥珀酸盐10β-胡萝卜素1力肽500右旋糖酐0.5β-巯基乙酸20吐温8030烟酰胺10维生素E5抗坏血酸20生物素0.06氯化胆碱100乙醇胺3七水硫酸亚铁150六水合氯化镁40丙酮酸钠70丁酸钠100亚油酸0.0002亚麻酸0.07硫酸铜15硫酸铁1.3盐酸吡哆醇5氢化可的松5地塞米松0.001D-泛酸钙6硫酸钴1硝酸钾0.1肌醇2酚红5孕酮0.03磷酸二氢钙0.23谷胱甘肽5丙酮酸5葡萄糖酸锰5亚硒酸钠0.02延胡索酸10甜菜碱20半胱胺0.07核黄素0.5磷酸吡哆醛0.05吡啶甲酸铬0.32硒代甲硫氨酸0.05；上述各组分含量的单位均为mgL。

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