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申请/专利权人：华中农业大学
申请日：2020-10-21
公开（公告）日：2024-04-19
公开（公告）号：CN112251422B
主分类号：C12N9/12
分类号：C12N9/12;C07K19/00;C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.04.19#授权;2021.02.09#实质审查的生效;2021.01.22#公开
摘要：本发明公开了一种含独特分子标签序列的转座酶复合体及其应用，所述转座酶复合体为由寡聚核苷酸接头和转座酶组装形成的复合体；利用本发明所述的含有UMI标签的转座酶复合体构建的二代测序文库，能够有效区分转座酶插入重复事件和PCR导致的重复读段，提高了测序数据的利用率、序列变异及其频率鉴定的可靠性、基因表达和染色质可及性定量的准确性，以及鉴定DNA结合蛋白的足迹的敏感性。
主权项：1.一种含独特分子标签序列的转座酶复合体，其特征在于：所述转座酶复合体为由寡聚核苷酸接头和转座酶组装形成的复合体；转座酶为Tn5转座酶；且所述寡聚核苷酸接头的第一链从5′端到3′端依次包括通用接头序列、间隔序列、UMI标签序列或者UMI复合标签序列、间隔序列、条码序列和ME序列，间隔序列由长度为0～20bp的可替换的非随机的序列组成，GC含量为25％-75％；ME序列为用于与转座酶结合的序列；所述寡聚核苷酸接头的第一链的表达式为：[]cgacgctcttccgatct{}AGATGTGTATAAGAGACA，其中，cgacgctcttccgatct为通用接头序列的末端，通用接头序列[]cgacgctcttccgatct的长度为10～50个核苷酸；{}为UMI标签序列或UMI复合标签序列，UMI复合标签由多个依次连接的UMI标签序列组成且UMI标签序列为一种或多种；或者由多个由间隔序列分隔的UMI标签序列组成且UMI标签序列为一种或多种；UMI标签序列长度为2～50个核苷酸；UMI复合标签序列长度为4～50个核苷酸；为条码序列，其长度为0～50个核苷酸，用于调节碱基平衡；AGATGTGTATAAGAGACA为ME序列；所述寡聚核苷酸接头的第二链为包含ME序列的互补序列。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 华中农业大学 含独特分子标签序列的转座酶复合体及其应用
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