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一种基于taq酶和bst酶的等温扩增方法 

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申请/专利权人:上海市浦东新区浦南医院;上海原科实业发展有限公司

摘要:本发明公开一种基于taq酶和bst酶的等温扩增方法,属于生物技术领域,其包括以下步骤:S1:设计引物和模板,以KPC‑2基因亚型和NDM‑1基因亚型为模板进行引物设计;S2:准备反应体系,S3:等温扩增反应,将反应混合物置于qPCR仪中,进行Taq酶和Bst酶的PCR扩增;S4:扩增信号分析,反应完成后,qPCR仪器记录反应过程中的荧光反应信号,以判断反应的效果;本发明解决了传统PCR技术在速度和操作复杂性方面的限制,提供了一种更快、更简单、成本更低的碳青霉烯酶耐药基因检测方法,适用于快速诊断和公共卫生监测。

主权项:1.一种基于taq酶和bst酶的等温扩增方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:设计引物和模板,以KPC-2基因亚型和NDM-1基因亚型为模板进行引物设计;S2:准备反应体系,反应体系的体积为25ul,包含:2.5ul10x反应缓冲液,3.5-4.0ul10mMdNTPs,2ul100mMMgSO4,2ul10xLAMP引物,1-1.5ulBst3.0,1-1.5ultaqpolymerase,1ul25xSYBR,1ul模板,最后加双蒸水到25ul;S3:等温扩增反应,将反应混合物置于qPCR仪中,进行Taq酶和Bst酶的PCR扩增;S4:扩增信号分析,反应完成后,qPCR仪器记录反应过程中的荧光反应信号,以判断反应的效果。

全文数据:

权利要求:

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