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申请/专利权人：海南大学
申请日：2023-02-28
公开（公告）日：2024-05-14
公开（公告）号：CN116334124B
主分类号：C12N15/82
分类号：C12N15/82;C12N15/65;C12N15/52;C12N15/56;C12N15/53;C12N15/54;A01H6/00;A01H5/00
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.05.14#授权;2023.07.14#实质审查的生效;2023.06.27#公开
摘要：本发明公开了一种俄罗斯蒲公英单遗传转化方法及应用，包括俄罗斯蒲公英外植体预培养、侵染、共培养、恢复培养、筛选培养、生根培养等步骤。本发明能够最终筛选出再生能力强，分化效率高的俄罗斯蒲公英种质，建立了一个简单高效的遗传转化方法，可在2‑3个月内获得转基因植株，且转基因植株生长状态生长良好，简单易行、周期短。
主权项：1.一种俄罗斯蒲公英单遗传转化方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：俄罗斯蒲公英外植体预培养：挑选长势良好的俄罗斯蒲公英叶片，进行切割和灭菌处理后作为外植体，预培养3天；S2：侵染：取步骤S1中预培养的外植体放入预先制备好的侵染液中，28℃，220rpm培养30min，从侵染液中取出外植体，将叶片表面的侵染液用无菌滤纸吸干；S3：共培养：待步骤S2中的外植体表面菌液干透后，将叶片置于共培养基中培养3天；S4：恢复培养：将步骤S3中的外植体转入恢复培养基中培养7天；S5：筛选培养：将步骤S4中的外植体转入筛选培养基中，每隔10天更换一次新鲜培养基直至分化出不定芽，所述筛选培养基配方为：MS盐+30gL蔗糖+1mgLKT+0.4mgLIAA+300mgLTimentin+10mgLhygromycin+3gL植物凝胶，pH5.8；S6：生根培养：将步骤S5中分化出来的不定芽转入生根培养基中进行生根，每隔7天更换一次新的培养基直至生根，将已生根的不定芽转入新的生根培养基中继续培养，直至成为完整的俄罗斯蒲公英植株。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 海南大学 一种俄罗斯蒲公英遗传转化方法及应用
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