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申请/专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
申请日：2024-02-04
公开（公告）日：2024-05-24
公开（公告）号：CN118064610A
主分类号：C12Q1/689
分类号：C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/14;C12N15/113;C12N9/22;C12R1/445
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.11#实质审查的生效;2024.05.24#公开
摘要：本发明公开了一种用于现场检测金黄色葡萄球菌pvl毒力基因的CRISPR核酸检测试剂盒、方法和应用，其采用用于检测金黄色葡萄球菌pvl毒力基因的CRISPR核酸检测试纸，CRISPR核酸检测试纸是基于消线法的侧向流试纸，利用CRIPSR‑Cas13a系统对金黄色葡萄球菌pvl毒力基因进行检测；CRISPR‑Cas13a系统包括crRNA，或其与Cas13a蛋白形成的复合体；crRNA包括用于与Cas13a蛋白结合的锚定序列和靶向金黄色葡萄球菌pvl毒力基因靶点序列的向导序列；金黄色葡萄球菌pvl毒力基因靶点序列位于金黄色葡萄球菌pvl毒力基因组第1659‑1686位；试纸包括应用于金黄色葡萄球菌pvl毒力基因核酸的消线法试纸。本发明的CRISPR核酸检测试纸可通过CRISPR‑Cas13a系统实现对金黄色葡萄球菌pvl毒力基因核酸的高灵敏、高特异、便捷检测，灵敏度达到1copiesμL。
主权项：1.一种用于检测金黄色葡萄球菌pvl毒力基因的试剂盒，包括用于检测金黄色葡萄球菌pvl毒力基因的CRISPR-Cas13a系统和与其配套使用的侧向流试纸；所述用于检测金黄色葡萄球菌pvl毒力基因的CRISPR-Cas13a系统包括如下a1-a3；a1单独包装的crRNA和LwCas13a蛋白，或crRNA和LwCas13a蛋白复合体；所述crRNA的靶点序列为序列1；a2报告RNA，其由20个U组成，且所述报告RNA的序列两端分别标记FAM和生物素；a3用于扩增待测样本靶点序列的RAA扩增引物，且所述RAA扩增引物中的一条引物的5'末端具有被T7RNA聚合酶识别的区域；所述侧向流试纸依次包括样品板、与纳米金抗FITC抗体、链亲和素线、抗体捕获线和吸收板；所述抗体捕获线包被的抗体为羊抗兔IgG。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种用于现场检测金黄色葡萄球菌pvl毒力基因的CRISPR核酸检测试剂盒、方法和应用
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