申请/专利权人：河南中医药大学

申请日：2021-12-08

公开（公告）日：2024-05-24

公开（公告）号：CN114136738B

主分类号：G01N1/28

分类号：G01N1/28;G01N1/30

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.24#授权;2022.03.22#实质审查的生效;2022.03.04#公开

摘要：本发明涉及用于观察艾叶下表皮特征的显微制片方法，有效解决用光学显微镜对艾叶下表皮的气孔、表皮细胞的垂周壁式样以及腺毛和非腺毛的分布进行观察的问题，新鲜的艾叶片剪取小块，在甲醇中浸没处理，转移至盐酸浸泡，蒸馏水漂洗，用氢氧化钠和双氧水的混合液浸泡，解离叶肉组织并漂白，转至酒精中，除去叶表皮上的非腺毛；转入铬酸和硝酸的混合液中静置，解离叶肉组织，再用酒精漂洗，分离上、下表皮，除去内表皮的叶肉组织，上、下表皮用甲苯胺蓝O溶液染色，用水漂洗洗去浮色，水封片，即成，本发明操作简单，成本低，工作量小，成功率高，观察清晰，效果好，解决艾叶下表皮观察的技术难题，对操作人员技术要求不高，即可到达理想的效果。

主权项：1.一种用于观察艾叶下表皮特征的显微制片方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）叶片处理：取新鲜的艾叶片，剪取6-8mm小块，室温在甲醇中浸没处理6～10h；（2）盐酸浸泡：用镊子将小块叶片从甲醇转移至质量浓度10%～15%的盐酸中，室温浸泡8～12h；（3）分离叶肉漂白：将小块叶片取出，用蒸馏水漂洗1～3min，将小块叶片置入体积比1︰1的质量浓度5%～10%氢氧化钠和2%～3%双氧水的混合液中，室温浸泡6～12h，解离叶肉组织，同时也将其漂白；（4）除去非腺毛：将小块叶片转移至质量浓度28-32%的酒精中，用毛笔轻刷叶表皮，除去叶表皮上的非腺毛；（5）解离叶肉：再将小块叶片置入质量浓度10%铬酸和10%硝酸体积比1：1的混合液中，室温静置6～10h，解离叶肉组织；（6）分离上、下表皮：从混合液中取出小块叶片，质量浓度38-32%的酒精中漂洗1～3min，在酒精中用毛笔轻刷叶片表皮，分离上、下表皮，将上、下表皮的内表皮分别用毛笔轻刷，除去叶肉组织；（7）染色：将上、下表皮用质量浓度40%～60%的碘化钠溶液透明0.5～1h，分别放在载玻片上，在上方滴加一滴甲苯胺蓝O溶液，染色1～3min；所述的甲苯胺蓝O溶液为，甲苯胺蓝O用pH4.0的磷酸盐缓冲液溶解制成，甲苯胺蓝O的质量浓度0.1%～0.5%；（8）封片：载玻片上的上、下表皮用水漂洗洗去浮色，水封片，即成用于普通光学显微观察艾叶下表皮特征的显微镜片。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 河南中医药大学 一种用于观察艾叶下表皮特征的显微制片方法

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