申请/专利权人:浙江大学绍兴研究院;杭州博圣医学检验实验室有限公司;浙江博圣生物技术股份有限公司;浙江大学医学院附属第一医院
申请日:2024-03-18
公开(公告)日:2024-05-28
公开(公告)号:CN118086284A
主分类号:C12N15/10
分类号:C12N15/10;C12Q1/6806;C12Q1/6844;C12Q1/6869;C40B50/06
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.06.14#实质审查的生效;2024.05.28#公开
摘要:本发明公开了可用于人全血样本中环状线粒体基因组分离、富集的方法,涉及高通量测序技术领域,该可用于人全血样本中环状线粒体基因组分离、富集的方法包括以下步骤:采用核酸外切酶V对人全血DNA样本中的核基因组DNA进行酶切消化反应,生成分离后的mtDNA;对mtDNA进行琼脂糖凝胶电泳鉴定;对mtDNA进行等温滚环扩增富集;将等温滚环扩增产物作为底物进行DNA测序文库构建,并利用DNA测序文库对mtDNA进行测序。本发明仅通过一次消化反应及一次等温滚环扩增反应即可获得足量的、高质量线粒体DNA样本,降低了核基因组的干扰及普通变温扩增PCR引入假变异的可能性。
主权项:1.可用于人全血样本中环状线粒体基因组分离、富集的方法,其特征在于,该可用于人全血样本中环状线粒体基因组分离、富集的方法包括以下步骤:S1、采用核酸外切酶V对人全血DNA样本中的核基因组DNA进行酶切消化反应,生成分离后的mtDNA;S2、对mtDNA进行琼脂糖凝胶电泳鉴定,依据电泳条带的大小及有无判断人全血DNA样本中的核基因组DNA是否完全消化;S3、对mtDNA进行等温滚环扩增富集,生成等温滚环扩增产物;S4、将等温滚环扩增产物作为底物进行DNA测序文库构建,并利用DNA测序文库对mtDNA进行测序。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 浙江大学绍兴研究院;杭州博圣医学检验实验室有限公司;浙江博圣生物技术股份有限公司;浙江大学医学院附属第一医院 可用于人全血样本中环状线粒体基因组分离、富集的方法
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