申请/专利权人:北京理工大学
申请日:2023-09-04
公开(公告)日:2024-06-07
公开(公告)号:CN117467552B
主分类号:C12N1/19
分类号:C12N1/19;C12N15/31;C12N15/81;C12P33/00;C12R1/865
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.06.07#授权;2024.02.20#实质审查的生效;2024.01.30#公开
摘要:本发明涉及高产齐墩果酸的酿酒酵母菌株、构建方法及其应用,属于生物学技术领域。对产齐墩果酸酿酒酵母生产菌株进行细胞全局代谢流模拟计算,确定使产齐墩果酸提产的靶向基因,然后通过基于丙二酰辅酶A诱导调控的反向转录方式对靶向基因实现阶段性表达沉默,实现菌株的生长与生产代谢流震荡变化,得到高产齐墩果酸的酿酒酵母菌株。本发明提出的基于全局代谢计算的动态代谢途径调控策略可有效提升酿酒酵母生产植物天然产物OA的能力,是一种有效的工程菌改造方法。
主权项:1.高产齐墩果酸的酿酒酵母菌株,其特征在于:对产齐墩果酸酿酒酵母生产菌株进行细胞全局代谢流模拟计算,确定使产齐墩果酸提产的靶向基因,然后通过基于丙二酰辅酶A诱导调控的反向转录方式对靶向基因实现阶段性表达沉默,实现菌株的生长与生产代谢流震荡变化,得到高产齐墩果酸的酿酒酵母菌株;其中,所述产齐墩果酸酿酒酵母生产菌株为酿酒酵母工程菌株(Saccharomycescerevisiae)OA07;所述靶向基因为fol3、abz2或pha2;通过基于丙二酰辅酶A诱导调控的反向转录方式对靶向基因实现阶段性表达沉默时:在出发菌株中引入了丙二酰辅酶A相关的转录因子FapR,该转录因子为丙二酰辅酶A诱导型启动子PTDH3-BS23的抑制型反式作用元件,其调控作用受丙二酰辅酶A的抑制;然后,在丙二酰辅酶A合成基因ACC1的3’端反向插入启动子PTDH3-BS23,构建丙二酰辅酶A诱导的反义转录操作元件,使ACC1的合成受丙二酰辅酶A抑制;最后,在出发菌株基因沉默位点的3’端也反向插入启动子PTDH3-BS23,构建得到高产齐墩果酸的酿酒酵母菌株。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 北京理工大学 高产齐墩果酸的酿酒酵母菌株、构建方法及其应用
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