申请/专利权人:广东永顺生物制药股份有限公司;华南农业大学
申请日:2024-02-06
公开(公告)日:2024-06-11
公开(公告)号:CN118165935A
主分类号:C12N5/079
分类号:C12N5/079;C12N5/00
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.06.28#实质审查的生效;2024.06.11#公开
摘要:本发明属于生物领域,公开了一种免消化的细胞传代方法,包括如下步骤:步骤1:贴壁细胞消化后得到细胞悬液,将细胞悬液、微载体、培养液混合后在转瓶中进行悬浮培养,获得悬浮培养混合液,所述贴壁细胞在悬浮培养混合液中的微载体的表面形成单层细胞;步骤2:将表面长满单层细胞的微载体、空的微载体、培养液混合,在转瓶中进行流动贴壁培养;该方法采用悬浮培养的方式得到具有单层细胞的微载体,然后利用流动贴壁培养的方式进行细胞的传代,通过这种方法,可以免去消化的步骤,极大的降低了生产成本,使贴壁细胞的传代扩繁变得简单高效。
主权项:1.一种免消化的细胞传代方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1:贴壁细胞消化后得到细胞悬液,将细胞悬液、微载体、培养液混合后在转瓶中进行悬浮培养,获得悬浮培养混合液,所述贴壁细胞在悬浮培养液中的微载体表面长成单层细胞;步骤2:将表面具有单层细胞的微载体、空的微载体、培养液混合,在转瓶中进行流动贴壁培养;所述步骤1中转瓶的转速大于步骤2中的转瓶的转速;所述步骤1中的微载体处于悬浮状态;所述步骤2中的微载体处于非悬浮状态且沿着转瓶的内壁流动;所述转瓶包括瓶体;所述瓶体的内壁设有多条沿内壁凸起的凸条,相邻两条凸条构成一条沿瓶体轴向延伸的凹槽;在垂直于瓶体的轴线方向上,所述瓶体的内壁的截面展开后构成一条连续起伏的曲线。
全文数据:
权利要求:
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