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申请/专利权人：上海青平药业有限公司
申请日：2020-12-31
公开（公告）日：2024-06-11
公开（公告）号：CN112662720B
主分类号：C12P21/02
分类号：C12P21/02;C12N1/21;C12N15/52;C12N15/75;C12N15/77;C12N15/66;C12R1/125;C12R1/15
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.11#授权;2021.05.04#实质审查的生效;2021.04.16#公开
摘要：本发明涉及一种重组枯草芽孢杆菌及谷胱甘肽的制备方法，采用过表达双功能谷胱甘肽合成酶基因的枯草芽孢杆菌基因工程菌株发酵生产所述的谷胱甘肽，不仅谷胱甘肽产量高、得率高，而且操作简单、方便，同时该方法以食品级枯草芽孢杆菌作为生产菌株，更加安全、可靠，为工业化绿色生产谷胱甘肽提供了有效的参考和借鉴。
主权项：1.一种谷胱甘肽的制备方法，其特征在于：采用过表达双功能谷胱甘肽合成酶基因的重组枯草芽孢杆菌基因工程菌株发酵生产所述的谷胱甘肽，所述的双功能谷胱甘肽合成酶基因为来源于Streptococcusthermophilus的gshFst基因，所述的基因序列如SEQIDNO.1所示，将所述的重组枯草芽孢杆菌基因工程菌株接种至发酵培养基中进行发酵培养，在发酵培养的同时分批添加补料液，并控制发酵培养的温度为35~40℃，pH为6.5~7.5，发酵培养至OD600为45~55；然后加入诱导剂继续培养至OD600为60~70，再加入谷氨酸、甘氨酸、半胱氨酸，且添加的所述的谷氨酸、所述的甘氨酸、所述的半胱氨酸在反应体系中的初始浓度分别为80~120mM，继续培养至所述的谷胱甘肽的产量不再增加，所述的发酵培养基包括如下组分：碳源5～20gL、氮源2～8gL、无机盐及微量元素1.5～35gL、可选择性地添加的生长因子5～50μgL，其中，所述的碳源为玉米粉、玉米浆、糖蜜、蔗糖、葡萄糖、甘油、糊精中的一种或多种；所述的氮源为牛肉膏、酵母粉、蛋白胨、尿素中的一种或多种；所述的无机盐及微量元素为磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、氯化铵、氯化钾、氯化钠、氯化镁、碳酸钙、硫酸铵、硫酸镁、硫酸锰中的一种或多种；所述的生长因子为生物素、维生素B1、维生素B6中的一种或多种，所述的补料液的组分包括葡萄糖、酵母抽提物、蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、玉米浆、硫酸镁、甘油中的一种或多种，所述的补料液的浓度为400～520gL。
全文数据：
权利要求：
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