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申请/专利权人：新格元(南京)生物科技有限公司
申请日：2022-09-02
公开（公告）日：2024-06-14
公开（公告）号：CN118202066A
主分类号：C12Q1/6806
分类号：C12Q1/6806;C12Q1/6809;C40B20/04
优先权：["20210902 CN PCT/CN2021/116255"]
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.14#公开
摘要：本发明提供了用于单细胞分析的方法，包括将细胞和附着有多个条形码寡核苷酸的珠子划分成一个分区。多个条形码寡核苷酸中的每个条形码寡核苷酸可包含细胞条形码和唯一分子标识符UMI，通过寡核苷酸末尾的polyT序列，与mRNA的polyA序列进行结合，完成mRNA的捕获。通过反转录和PCR扩增，分别完成mRNA的一链和二链合成。将一部分cDNA用于构建转录组测序文库，另一部分cDNA通过环化，形成环状双链cDNA，以此为模板，进行靶基因的特异性富集。由于两部分的cDNA携带的cellbarcode信息是匹配的，通过测序之后的Barcode序列匹配，就能获得细胞的表达谱信息和配对的靶基因序列信息。
主权项：一种在单细胞水平分析细胞基因表达水平以及靶基因序列的方法，其包括：a.将细胞和附着有多个条形码寡核苷酸的珠子共同落入同一个微孔，其中，多个条形码寡核苷酸的每个条形码寡核苷酸包括细胞条形码和唯一分子标识符UMI，其中多个条形码寡核苷酸的第一条形码寡核苷酸每个包含能够结合第一信使核糖核酸mRNA靶标的polyA尾的polyT序列；b.在二链合成之后，一部分cDNA会进行环化，形成环状双链cDNA；c.环状cDNA被用于进行靶基因的富集；以及d.匹配分析转录组信息与靶基因信息。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 新格元(南京)生物科技有限公司 高通量单细胞靶向测序的试剂和方法
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