申请/专利权人：北京林业大学;山西霖巍生物科技有限公司

申请日：2024-04-02

公开（公告）日：2024-06-18

公开（公告）号：CN118207128A

主分类号：C12N1/20

分类号：C12N1/20;C12N1/04;C12Q3/00;G06V10/762;G06V10/28;G06V10/30;G06V10/44;C12R1/07;C12R1/01

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.06.18#公开

摘要：本申请涉及生物技术领域，具体涉及一种基于植物内生菌的混合菌剂制备方法，该方法包括：将多粘类芽孢杆菌与坚强芽孢杆菌，于活化培养基中培养，将活化后的两种芽孢杆菌单菌落分别接种于种子培养基中，在摇瓶中震荡培养，分别接入两种芽孢杆菌种子液，进行发酵；当发酵监测到最大菌体浓度后，停止补料，调节通气、溶氧量以及转速，继续发酵，在两种芽孢杆菌的混合菌剂的发酵过程中，采集各时刻的混合菌剂图像以及发酵监测数据对发酵时间进行调整，将两类芽孢杆菌混合发酵液与载体及冻干保护剂混匀进行离心、沉淀、预冷、冻干操作，得到混合菌剂。本申请旨在对混合菌剂的发酵时间进行调整，提高混合菌剂的稳定性与抗逆性。

主权项：1.一种基于植物内生菌的混合菌剂制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：1将多粘类芽孢杆菌与坚强芽孢杆菌经水浴热激后，于活化培养基中培养，得到活化后的多粘类芽孢杆菌与坚强芽孢杆菌单菌落；2将活化后的多粘类芽孢杆菌与坚强芽孢杆菌单菌落分别接种于种子培养基中，在摇瓶中震荡培养，分别得到多粘类芽孢杆菌和坚强芽孢杆菌种子液；3分别将一定接种量的多粘类芽孢杆菌与坚强芽孢杆菌种子液，共同接种于含有干酒糟酶解液的发酵培养基；在发酵过程中，维持溶氧量、控制pH、维持发酵液中葡萄糖浓度；4当发酵监测到最大菌体浓度OD620后，停止补料，调节通气、溶氧量以及转速，继续发酵；在多粘类芽孢杆菌与坚强芽孢杆菌的混合菌剂的发酵过程中，采集各时刻的混合菌剂图像以及混合菌剂发酵监测数据；混合菌剂发酵监测数据包括但不限于多粘类芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌的有效活菌数；4.1根据各时刻的混合菌剂图像像素点的局部边缘分布以及灰度值分布得到各像素点的芽孢匹配指数；4.2根据各时刻的混合菌剂图像中所有像素点的芽孢匹配指数的分布结合分割算法得到各时刻的混合菌剂图像的芽孢发育成熟指数；4.3根据连续时刻的混合菌剂图像的芽孢发育成熟指数以及混合菌剂发酵监测数据结合趋势检验对发酵时间进行调整，得到多粘类芽孢杆菌和坚强芽孢杆菌的混合发酵液；5将多粘类芽孢杆菌和坚强芽孢杆菌的混合发酵液与载体及冻干保护剂混匀进行、离心、沉淀、预冷、冻干操作，得到混合菌剂。

全文数据：

权利要求：

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