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申请/专利权人：深圳华大生命科学研究院
摘要：本发明提供了一种小RNA的建库方法。该构建方法包括：对小RNA进行3′接头连接，得到3′接头连接产物；采用过量MLV反转录酶对3′接头连接产物进行反转录，得到反转录产物；对反转录产物进行PCR扩增，得到小RNA文库。通过采用过量MLV反转录酶对连接了3′接头的连接产物进行反转录，过量的逆转录酶对RNA模板中的2′‑O‑甲基修饰的敏感性低，且MLV反转录酶会不依赖模板在cDNA的3′端生成2‑5个C，延长的C可以和5′端接头互补，继续反转录即可获得带有5′接头的反转录产物，既省略了反转录前5′接头连接的步骤，又能避免常规5′接头连接的偏差，此外还能降低RNA自连现象，提高反转录效率。
主权项：1.一种小RNA文库的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括：对小RNA进行3′接头连接，得到3′接头连接产物；采用过量MLV反转录酶对所述3′接头连接产物进行反转录，得到反转录产物；对所述反转录产物进行PCR扩增，得到所述小RNA文库。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 深圳华大生命科学研究院 小RNA的建库方法
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