申请/专利权人:北京理工大学
申请日:2024-03-27
公开(公告)日:2024-06-18
公开(公告)号:CN118207263A
主分类号:C12P7/42
分类号:C12P7/42;C12R1/19
优先权:
专利状态码:在审-公开
法律状态:2024.06.18#公开
摘要:本发明公开了化学合成技术领域的一种利用全细胞生物合成丁香酸的制备方法,步骤一:准备实验所需材料;步骤二:将单菌落接种到添加抗生素的培养基中,进行过夜培养,培养物接种三角瓶中培养,加入异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷进行诱导,持续培养;步骤三:将菌液低温低速离心收集细胞,利用PBS缓冲液将细胞重悬,制备催化反应体系,进行催化反应,然后离心取上清液用滤膜除去杂质;步骤四:将全细胞催化液与莽草酸混合,加入催化剂,在催化条件下进行反应,反应结束后获得丁香酸。本发明相比化学合成法,全细胞生物合成法的目标产物分离提取难度低,回收率高,操作简便,具有高效、环保和可持续的优点,可以实现丁香酸的绿色、可持续生产。
主权项:1.一种利用全细胞生物合成丁香酸的制备方法,其特征在于,具体步骤如下:步骤一:准备实验所需材料:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷、抗生素、PBS缓冲液、SAM和MgCl2;步骤二:将单菌落接种到4mL添加抗生素的培养基中,在恒温摇床中进行过夜培养,培养物接种在含有50mL添加抗生素的培养基的三角瓶中,然后经过培养,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷进行诱导,持续在37℃培养16-18h;步骤三:将步骤二中的菌液低温低速离心20min收集细胞,利用PBS缓冲液将收集的细胞重悬,制备催化反应体系,在24孔板中进行催化反应,每个孔中加入1mL的催化反应体系进行全细胞催化,将全细胞催化液以12000转速在室温下离心2min后,取上清液用0.22μm滤膜除去其中的杂质;步骤四:将收集到的全细胞催化液与莽草酸混合,加入催化剂,将混合液在催化条件下进行反应,反应结束后,获得高纯度的丁香酸。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 北京理工大学 一种利用全细胞生物合成丁香酸的制备方法
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