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申请/专利权人：北京化工大学
申请日：2024-03-12
公开（公告）日：2024-06-21
公开（公告）号：CN118222468A
主分类号：C12N1/21
分类号：C12N1/21;C12N15/70;C12N15/61;C12N15/55;C12N15/31;C12P7/02;C12R1/19
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.21#公开
摘要：本发明构建了一种能稳定遗传的生物合成肌醇的基因工程菌株。其特征在于：以敲除了使葡萄糖进入糖酵解和磷酸戊糖途径相关基因、使磷酸烯醇式丙酮酸转化为丙酮酸相关基因、进入三羧酸循环路径相关基因的菌株作为底盘菌，通过CRISPRCas9技术在宿主内用强启动子、多拷贝整合肌醇合成途径中的肌醇‑1‑磷酸合成酶基因、肌醇单磷酸酶基因至底盘菌的基因组上，使其具有单一稳定的染色体，不含质粒或其他游离DNA载体。同时，敲除了宿主中的甘油分解代谢基因、过表达来自抗辐射奇异球菌的全局调控因子，提升生产菌株的生长特性和生产稳定性。本发明既能实现实现肌醇的高产，又能摆脱应用质粒对工程菌生产造成不稳定的影响，对肌醇的工业化生产极具有应用前景。
主权项：1.构建一种能稳定遗传的生物合成肌醇的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌株以敲除了使葡萄糖进入糖酵解和磷酸戊糖途径相关基因、使磷酸烯醇式丙酮酸转化为丙酮酸相关基因、三羧酸循环路径相关基因的菌株作为底盘菌，通过CRISPRCas9技术在宿主内用强启动子、多拷贝整合肌醇合成途径基因INO1和suhB至底盘菌的基因组上，使其具有单一稳定的染色体，不含质粒或其他游离DNA载体。同时，通过敲除甘油分解代谢途径阻遏物glpR、过表达全局转录因子irrE提升了菌株的生长性能，获得了稳定遗传的肌醇高效生物合成的基因工程菌株。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 北京化工大学 稳定遗传生物合成肌醇的基因工程菌株的构建方法及其应用
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