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申请/专利权人：苏州海狸生物医学工程有限公司
申请日：2021-12-22
公开（公告）日：2024-06-18
公开（公告）号：CN114196668B
主分类号：C12N15/10
分类号：C12N15/10
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.18#授权;2022.04.05#实质审查的生效;2022.03.18#公开
摘要：本发明提供用于捕获PolyA+RNA的磁珠的制备方法，包括以下步骤：将羧基磁珠、活化剂和5’端伯氨基修饰的OligodT探针在偶联缓冲试剂中混合，在室温下反应16～20小时，得到捕获PolyA+RNA的磁珠。本发明中的工艺较链霉亲和素‑生物素法可大幅降低成本、且磁珠稳定性好，不会引入外源污染源，耐受高温以及含变性剂等样本中PolyA+RNA的捕获。可实现操作过程的高通量、自动化、捕获效率高、操作简单、无需昂贵设备等优点。本发明还提供了一种用于捕获PolyA+RNA的磁珠及其应用。
主权项：1.一种用于捕获PolyA（+）RNA的磁珠的制备方法，包括以下步骤：将羧基磁珠、活化剂和5’端伯氨基修饰的OligodT探针在偶联缓冲试剂中混合，进行活化和偶联，在室温下反应16~20小时，得到用于捕获PolyA（+）RNA的磁珠；所述偶联缓冲试剂包括100mmolL的吗啉乙磺酸和0.05%的Tween-20；所述偶联缓冲试剂的浓度为50~100mmolL，所述偶联缓冲试剂的pH为4.0~6.5；所述活化剂为EDC；所述磁珠的外层为聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸缩水甘油酯、琼脂糖或葡聚糖；所述磁珠的粒径为100nm~150μm；所述5’端伯氨基修饰的OligodT探针长度为10~30nt；所述羧基磁珠质量与5’端伯氨基修饰的OligodT探针的物质的量之比为1mg：（0.1~5）nmol。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 苏州海狸生物医学工程有限公司 一种用于捕获Poly A（+）RNA的磁珠、其制备方法及应用
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