申请/专利权人：佳木斯大学

申请日：2024-03-27

公开（公告）日：2024-06-21

公开（公告）号：CN117947138B

主分类号：C12Q1/02

分类号：C12Q1/02;C12M1/34;C12M3/00;C12M1/26;G01N33/00;G01N15/01

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.21#授权;2024.05.17#实质审查的生效;2024.04.30#公开

摘要：本发明涉及细胞测试技术领域，具体公开了一种口腔材料体外细胞毒性测试方法，步骤包括：制备牙本质圆片和嵌入井，将牙本质圆片粘贴在嵌入井底部作为屏障；使用组装装置组装培养装置；采用LED光固化灯从嵌入井上方照射，随后密封嵌入井井口，将培养装置放入恒温箱中培养；测定细胞相对增长率，根据细胞相对增长率值以及预构建的细胞毒性分级标准判定细胞毒性。本发明通过使用组装装置组装培养装置，使培养装置中的嵌入井和细胞培养容器快速组合，降低体外细胞毒性测试难度，具有耗时短、可重复性强、并能对不同材料的毒性进行比较等优点，能够广泛运用于口腔材料体外细胞毒性测试实验。

主权项：1.一种口腔材料体外细胞毒性测试方法，其特征在于，包括以下步骤：制备牙本质圆片和嵌入井（60），将牙本质圆片粘贴在嵌入井（60）底部作为屏障（80）；使用组装装置（100）组装培养装置（200），所述培养装置（200）包括嵌入井（60）和细胞培养容器（70）；所述组装装置（100）包括组装筒（10）、进料机构（20）、第一容器（30）、接种机构（40）和送料机构（50），其中，使用组装装置（100）组装培养装置（200）的方法，包括：通过进料机构（20）控制嵌入井（60）移动，使嵌入井（60）到达组装位置，嵌入井（60）到达组装位置时，嵌入井（60）进入组装筒（10）内部，且位于组装筒（10）中心；当嵌入井（60）到达组装位置时利用第一容器（30）将浸提液加入嵌入井（60）内部；利用接种机构（40）将细胞悬浮液接种于细胞培养容器（70）；通过送料机构（50）控制细胞培养容器（70）移动，使细胞培养容器（70）依次达到接种位置和组装位置，当细胞培养容器（70）达到接种位置时，细胞培养容器（70）位于接种机构（40）的接种器（41）正下方，当细胞培养容器（70）达到组装位置时，细胞培养容器（70）位于嵌入井（60）的正下方；采用LED光固化灯从嵌入井（60）上方照射，随后密封嵌入井（60）井口，将培养装置（200）放入恒温箱中培养；测定细胞相对增长率，根据细胞相对增长率值以及预构建的细胞毒性分级标准判定细胞毒性；使用组装装置（100）组装培养装置（200）的方法，包括以下步骤：向第一容器（30）内部添加充填材料（90）的浸提液，向接种器（41）内部添加细胞悬浮液，将细胞培养容器（70）置于送料机构（50），将嵌入井（60）置于进料机构（20）；启动送料机构（50），送料机构（50）控制细胞培养容器（70）到达接种位置，接种器（41）将细胞悬浮液接种于细胞培养容器（70）；启动进料机构（20），进料机构（20）控制嵌入井（60）到达组装位置，第一容器（30）向嵌入井（60）内部添加充填材料（90）的浸提液；送料机构（50）控制细胞培养容器（70）达到组装位置，组装筒（10）将嵌入井（60）装入细胞培养容器（70）；所述送料机构（50）安装于组装筒（10）下方，组装筒（10）内部设有腔体，腔体朝向送料机构（50）的一侧设有开口，送料机构（50）用于带动细胞培养容器（70）朝向组装筒（10）移动；所述进料机构（20）包括壳体（21）、限位架（23）和第二伸缩组件（24），所述壳体（21）与所述腔体连通，所述第二伸缩组件（24）的伸缩端与限位架（23）连接，限位架（23）用于固定嵌入井（60），第二伸缩组件（24）的伸缩端伸长时带动限位架（23）移动至腔体内部；所述送料机构（50）包括底板（51）、底座（52）、送料台（53）、驱动送料台（53）沿底座（52）移动的驱动组件以及用于固定细胞培养容器（70）的支撑架（54）；所述底座（52）固定安装在底板（51）上，所述送料台（53）滑动安装在底座（52）上，送料台（53）上均匀设置有多个支撑架（54）；所述驱动组件包括转动安装在所述底座（52）上的驱动螺杆（58）、第一齿轮（56）、第二齿轮（57）以及第一电机（55），所述驱动螺杆（58）转动安装在所述底座（52）上，驱动螺杆（58）与所述送料台（53）螺纹连接，所述驱动螺杆（58）的一端固定安装有第二齿轮（57），所述第一电机（55）安装在所述底座（52）上，第一电机（55）的输出端固定安装有第一齿轮（56），所述第一齿轮（56）与第二齿轮（57）啮合，且第一齿轮（56）为扇形齿轮结构；所述限位架（23）包括两个上下设置的限位环（231）和连接两个限位环（231）的连接板（235），所述连接板（235）与第二伸缩组件（24）的伸缩端连接；所述限位环（231）内侧的下方设置有若干限位条（233），所述限位条（233）通过至少一根摆动杆（232）与所述限位环（231）活动连接；所述限位环（231）位于摆动杆（232）的后侧还设置有安装板（236），所述安装板（236）通过弹簧（237）与所述摆动杆（232）连接。

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百度查询： 佳木斯大学 一种口腔材料体外细胞毒性测试方法

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