申请/专利权人：巴迪泰(广西)生物科技有限公司

申请日：2023-11-10

公开（公告）日：2024-06-21

公开（公告）号：CN117405876B

主分类号：G01N33/533

分类号：G01N33/533;G01N33/558;G01N33/543

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.21#授权;2024.02.02#实质审查的生效;2024.01.16#公开

摘要：本发明公开了诊断心脏疾病的三项联合检测试剂盒及其使用方法，试剂盒包括：探测物，其包括：第一探测物，其包含荧光标记的TnI抗体络合物和荧光标记的质控络合物；第二探测物，其包含生物素标记的TnI抗体络合物；第三探测物，其包含荧光标记的NT‑proBNP抗体络合物和荧光标记的D‑Dimer抗体络合物、DNP标记的D‑Dimer抗体络合物和荧光标记的质控络合物；试剂条；样本稀释液。本申请只需1次加样，用1个试剂条即可实现同时检测TnI、NT‑proBNP和D‑Dimer三个项目，且大幅度提高了TnI检测的灵敏度和D‑Dimer的检测范围，精密度较结合垫产品显著提高，并可室温运输和保存，方便用户使用。

主权项：1.诊断心脏疾病的三项联合检测试剂盒，其特征在于，包括：探测物，其包括：第一探测物、第二探测物和第三探测物；其中，将荧光标记的TnI抗体络合物和荧光标记的质控络合物制作成1颗固体小球，即所述第一探测物；将生物素标记的TnI抗体络合物制作成1颗固体小球，即所述第二探测物；将荧光标记的NT-proBNP抗体络合物和荧光标记的D-Dimer抗体络合物、DNP标记的D-Dimer抗体络合物和荧光标记的质控络合物制作成1颗固体小球，即所述第三探测物；试剂条，其包括垫卡、铺设于所述垫卡上的硝酸纤维素膜、依次间隔设于所述硝酸纤维素膜上的样本垫、质控线、第一检测线、第二检测线、第三检测线和第四检测线以及吸收垫；其中，所述质控线包被有chickenIgY；所述第一检测线包被有链霉亲和素和DNP混合抗体；所述第二检测线包被有链霉亲和素；所述第三检测线包被有NT-proBNP检测抗体；所述第四检测线包被有NT-proBNP检测抗体；样本稀释液，其与所述探测物彼此独立分开存放，所述样本稀释液可溶解所述探测物；其中，荧光标记的D-Dimer抗体络合物的制备方法为：将筛选出的D-Dimer捕获抗体用1×PBS配制成1-5mgmL的溶液，之后向上述溶液中添加体积为上述溶液体积2-20%的1M碳酸氢钠溶液，接着按最终溶液与荧光染料的质量比为1：0.01-1：0.5添加荧光染料，之后包裹避光，并置于混合器上，在30℃以下搅拌反应4小时以上，最后将标记好的荧光抗体络合物用填充交联葡聚糖G-25的层析柱进行纯化，收集首道流出的荧光抗体络合物，即得荧光标记的D-Dimer抗体络合物；生物素标记的TnI抗体络合物的制备方法为：将筛选出的TnI捕获抗体用1×PBS配制成1-5mgmL的溶液，之后向上述溶液中添加体积为上述溶液体积2-20%的1M碳酸氢钠溶液，室温反应30分钟以上，再按最终溶液与生物素的质量比为1：0.05-1：0.5添加生物素，之后包裹避光，并置于混合器上，在30℃以下搅拌反应4小时以上，最后将标记好的生物素抗体络合物用脱盐柱进行纯化，即得生物素标记的TnI抗体络合物；DNP标记的D-Dimer抗体络合物的制备方法为：将筛选出的D-Dimer检测抗体用1×PBS配制成1-5mgmL的溶液，之后向上述溶液中添加体积为上述溶液体积2-20%的1M碳酸氢钠溶液，室温反应30分钟以上，再按最终溶液与DNP的质量比为1：0.01-1：0.3添加DNP，包裹避光，置于混合器上，在30℃以下搅拌反应4小时以上，最后将标记好的DNP抗体络合物用脱盐柱进行纯化，即得DNP标记的D-Dimer抗体络合物；探测物的制备方法为：配制基础缓冲液，基础缓冲液由1×PBS加BSA和蔗糖配制而成，其中，BSA的质量分数为0.05-10%、蔗糖的质量分数为0.05-10%；配置探测物溶液：在基础缓冲液中分别添加适量的抗体络合物、质控络合物和阻断剂，配制得到含1-10μgmL荧光标记的TnI抗体络合物、0.01-3μgmL荧光标记的Anti-chickenIgY抗体络合物和100-500μgmL阻断剂的探测物溶液一；在基础缓冲液中添加适量的抗体络合物，配制得到含1.0-10μgmL生物素标记的TnI抗体络合物的探测物溶液二；在基础缓冲液中添加适量的抗体络合物、质控络合物和阻断剂，配制得到含1-50μgmLDNP标记的D-Dimer抗体络合物、1-50μgmL荧光标记的D-Dimer抗体络合物、0.01-5μgmL荧光标记的Anti-chickenIgY抗体络合物、1-10μgmL荧光标记的NT-proBNP抗体络合物和100-500μgmL阻断剂的探测物溶液三；探测物分装及冻干：在探测物分装机上安装200μL移液头，在分装机上输入分装次数后开始分装，将探测物溶液一、探测物溶液二和探测物溶液三分别分装至相应的试管中，各自分装20-80μL后称试管重量，确认分装后的试管重量和分装前的空试管重量的差是否与分装容量一致，确认分装的分装容量一致后，缓慢抬起分装机夹具，移除后，使用过滤网分离探测物溶液一、探测物溶液二和探测物溶液三；将得到的探测物溶液一、探测物溶液二和探测物溶液三分别转移至不锈钢容器中，之后放入冻干机冻干，即得第一探测物、第二探测物和第三探测物。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 巴迪泰(广西)生物科技有限公司 诊断心脏疾病的三项联合检测试剂盒及其使用方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD