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检测miRNA-21的荧光壳聚糖纤维的制备方法及检测miRNA-21的方法 

申请/专利权人:中国科学技术大学

申请日:2022-11-16

公开(公告)日:2024-06-25

公开(公告)号:CN115748011B

主分类号:D01F8/18

分类号:D01F8/18;D01F11/00;C08B37/08;C12Q1/6886;C12Q1/6806;C12Q1/682

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.25#授权;2023.03.24#实质审查的生效;2023.03.07#公开

摘要:本发明提供了一种检测miRNA‑21的荧光壳聚糖纤维的制备方法及检测miRNA‑21的方法。本制备方法是基于荧光染料罗丹明‑B的羧基活化及耦联壳聚糖氨基相关化学反应,以及基于目标分子miRNA‑21催化hairpin探针自组装,形成双链结构,而荧光壳聚糖纤维上带有淬灭基团BHQ2的DNA探针probe2被杂交双链H1‑H2取代,使壳聚糖纤维端头荧光光波导由淬灭转而恢复。不同浓度的miRNA‑21会使得荧光壳聚糖纤维端头荧光强度的变化不同,因此实现对miRNA‑21的定量检测。该检测miRNA‑21的方法对miRNA‑21显示了高的灵敏度和特异性,检测过程简便、灵敏、快速,检测结果准确。

主权项:1.一种检测miRNA-21的荧光壳聚糖纤维的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将罗丹明B溶于乙腈中制备罗丹明B溶液,将N-羟基琥珀酰亚胺溶于乙腈中制备N-羟基琥珀酰亚胺溶液,将罗丹明B溶液和N-羟基琥珀酰亚胺溶液混合于容器中,加热并搅拌;将1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐完全溶解于乙腈中,并滴加入所述容器中,反应,室温搅拌,旋干,得到羧基活化的罗丹明B-NHS产物;(2)将所述罗丹明B-NHS产物溶解于Na2CO3水溶液中,再加入壳聚糖粉末搅拌,除去液体并水洗,干燥,制得罗丹明B-壳聚糖粉末;(3)将罗丹明B-壳聚糖粉末和壳聚糖粉末混合形成混合物,将所述混合物溶解于三氟乙酸中,机械搅拌,挥发,得到荧光壳聚糖凝胶,将所述凝胶手工拉丝制备纤维,再将所述纤维浸泡于Na2CO3溶液中除酸,制得所述荧光壳聚糖纤维。

全文数据:

权利要求:

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