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申请/专利权人：合肥中科普瑞昇生物医药科技有限公司
申请日：2021-02-01
公开（公告）日：2024-06-25
公开（公告）号：CN114836383B
主分类号：C12N5/09
分类号：C12N5/09;C12N5/071;C12Q1/02
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.25#授权;2022.08.19#实质审查的生效;2022.08.02#公开
摘要：本发明提供了一种实现肠癌原代细胞体外快速扩增的培养基和培养方法。本发明的肠癌原代细胞培养基包含初始培养基、Rho蛋白酶抑制剂、抗生素、胃泌素、A8301、非必需氨基酸、霍乱毒素、胰岛素样生长因子‑1、烟酰胺、胰岛素、胎牛血清、以及选自B27添加剂和N2添加剂中的至少一种的添加剂。通过使用本发明的肠癌原代细胞培养基，能够实现肠癌原代细胞的有效快速扩增，这样扩增得到的细胞保持了患者的病理特性，提高了肠癌原代细胞的培养成功率和细胞扩增速率，可以为患者的个性化治疗提供研究基础。
主权项：1.一种肠癌原代细胞培养基，其特征在于，由以下组分组成：初始培养基、Y27632、抗生素、胃泌素、A8301、非必需氨基酸、霍乱毒素、胰岛素样生长因子-1、烟酰胺、胰岛素、胎牛血清、以及B27添加剂，所述初始培养基选自DMEMF12、DMEM、F12或RPMI-1640，其中，所述Y27632的浓度为2.5～40μM；所述抗生素选自链霉素青霉素、两性霉素B和Primocin中的一种或多种，当选自链霉素青霉素时，链霉素浓度范围为25～400μgmL，青霉素浓度范围为25～400UmL；当选自两性霉素B时，浓度范围为0.25～4μgmL；当选自Primocin时，浓度范围为25～400μgmL；所述胃泌素的浓度为1.25～20nM；所述A8301的浓度为25～200nM；所述非必需氨基酸为选自甘氨酸、丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸和丝氨酸中的一种或多种，总浓度为25～400μM；所述霍乱毒素的浓度为1.25～20ngmL；所述胰岛素样生长因子-1的浓度为5～405ngmL；所述烟酰胺的浓度为2～8mM；所述胰岛素的浓度为0.5～4μgmL；所述胎牛血清相对于培养基的体积浓度为2.5％vv～5％vv；所述B27添加剂相对于培养基的体积比为1:25～1:200。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 合肥中科普瑞昇生物医药科技有限公司 肠癌原代细胞的培养基及培养方法
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