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一种循环肿瘤细胞捕获方法 

申请/专利权人:中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所

申请日:2022-04-11

公开(公告)日:2024-06-25

公开(公告)号:CN114874989B

主分类号:C12N5/09

分类号:C12N5/09;C12M3/00;C12M1/26

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.25#授权;2022.08.26#实质审查的生效;2022.08.09#公开

摘要:本发明涉及一种循环肿瘤细胞捕获方法,包括以下步骤:将待测细胞液进行红细胞裂解后,加入设置有细胞芯片的培养容器中,细胞芯片包括基体以及阵列在基体表面的盲孔,待细胞进入盲孔中后加入培养基进行培养,培养过程中待测细胞液中的循环肿瘤细胞可增殖成细胞球,加入与循环肿瘤细胞特异性反应的荧光抗体,根据荧光和细胞增殖情况定位循环肿瘤细胞。利用规律排列的微孔、荧光抗体、细胞形态以及增殖情况可以精准鉴定和定位CTC,解决了现有技术中由于部分抗体假阳性造成的干扰从而引起的CTC捕获准确度不高以及CTC活力低的问题。

主权项:1.一种循环肿瘤细胞捕获方法,其特征在于,包括以下步骤:将待测细胞液进行红细胞裂解后,加入设置有细胞芯片的培养容器中,所述细胞芯片包括基体以及阵列在所述基体表面的盲孔;待细胞进入所述盲孔中后加入培养基进行培养,培养过程中待测细胞液中的循环肿瘤细胞增殖成细胞球,加入与所述循环肿瘤细胞特异性反应的荧光抗体,根据荧光和细胞增殖情况定位所述循环肿瘤细胞;所述细胞芯片的材质为水凝胶;所述待测细胞液为乳腺癌的血液样本;所述培养基为DMEMF12培养基,所述DMEMF12培养基还含有5-15wt%胎牛血清、1-3wt%青链霉素混合溶液、0.2-0.8wt%庆大霉素、0.1-0.3wt%两性霉素B、20-50ngmL表皮细胞生长因子、1-2µML-谷氨酰胺、2-30ngmL胃泌素、80-180ngmLWnt3a蛋白、200-400ngmLR-spondin1蛋白、50-150ngmLNoggin蛋白、1-2µMTGFl3受体抑制剂和5-15mM烟酰胺。

全文数据:

权利要求:

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