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申请/专利权人：中国科学院重庆绿色智能技术研究院
申请日：2021-11-25
公开（公告）日：2024-06-25
公开（公告）号：CN114113222B
主分类号：G01N27/00
分类号：G01N27/00;G01N27/60;B82Y40/00
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.25#授权;2022.03.18#实质审查的生效;2022.03.01#公开
摘要：本发明涉及分子检测技术领域，具体涉及一种基于固态纳米孔技术鉴定脂多糖的方法以及利用所述的方法判定脂多糖菌种来源及同菌种不同亚型的方法。所述脂多糖的鉴定方法为：在外加电压下测试待测样本在固态纳米孔中的过孔时间和或过孔电流幅值和或过孔电流相对幅值比对所述待测样本中的脂多糖进行定性检测和或定量检测。本发明创造性地将固态纳米孔应用于脂多糖检测，并联用化学共价修饰策略，能有效抑制脂多糖检测过程的非特异性吸附，所述方法操作简便、成本低、灵敏度高、准确性好，能够通过分析脂多糖穿过纳米孔的特征数据判定脂多糖的对应菌种来源及同菌种不同亚型。
主权项：1.基于固态纳米孔技术鉴定脂多糖菌种来源和或同菌种不同亚型的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：1纳米孔制备：去除纳米孔载体材料表面的杂质后用食人鱼洗液浸泡，经清洗后用介电质击穿薄膜的方式制备纳米孔；所述纳米孔载体材料为硅基氮化硅薄膜；所述食人鱼洗液为体积比H2SO4:H2O2＝3:1；浸泡温度为80℃，浸泡时间为0.5-1h；2硅烷分子的固定：在通氮气条件下，取等体积的硅烷试剂与乙酸试剂加入到5mL去离子水中，通过磁力搅拌台反应0.5-1h，得到酸性硅烷试剂水溶液；将步骤1所得纳米孔放入所述酸性硅烷试剂水溶液中室温反应1-2h；反应后将基片用体积比为乙酸：去离子水＝1:100的溶液充分清洗3-5次，烘干后得到经硅烷分子修饰的固态纳米孔；所述固态纳米孔的直径为3-4nm；3使用无热原水配制1mgmL的脂多糖母液，涡旋振荡使其完全溶解，再用测试缓冲液稀释至浓度为1-10μgmL，获得待测样本；用去离子水清洗测试池两腔室后，注入测试缓冲液，再将所述待测样本换注到膜端腔室；在外加电压50mV下采集所述待测样本在固态纳米孔中的过孔时间和或过孔电流幅值和或过孔电流相对幅值比对所述待测样本中的脂多糖的菌种来源和或同菌种不同亚型进行判定；所述测试缓冲液为1MKCl，20mMMES，pH6。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国科学院重庆绿色智能技术研究院 基于固态纳米孔技术对脂多糖定性或菌种来源鉴定的方法
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