申请/专利权人：上海海事大学

申请日：2024-02-01

公开（公告）日：2024-06-28

公开（公告）号：CN117660268B

主分类号：C12N1/20

分类号：C12N1/20;C23F15/00;C12N1/38;C12R1/01;C12R1/25

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.28#授权;2024.03.26#实质审查的生效;2024.03.08#公开

摘要：本发明涉及一种提高海洋微生物代谢活性的方法，具体涉及通过提高海洋假交替单胞菌代谢活性生产抗腐蚀细菌液的方法、海洋抗腐蚀细菌液及其应用，属于海洋微生物防腐技术领域。通过对菌种培养条件的优化，先后使用活化培养、刺激培养和与乳酸菌共育培养的方式最大限度促进微生物中活性成分的快速分泌代谢，尤其是促进胞外多糖的大量分泌，形成的代谢物丰富的细菌培养液，在金属材料表面形成均匀致密的生物膜，能够在金属表面形成保护性屏障，从而有效抑制金属材料的海洋腐蚀。本发明处理方式简单，对金属类型无限制，生产制备成本低且对环境友好，能够为装备材料抗海洋环境腐蚀提供一种简单高效、绿色环保的新方法。

主权项：1.一种提高海洋微生物代谢活性的方法，其特征在于，包括如下步骤：1）基础培养基活化培养：将海洋假交替单胞菌接种至斜面培养基上在25-35℃下活化培养；接着将斜面培养基菌种转接至液体培养基中进行摇瓶培养，培养温度为25-35℃，转速120-180rpm，培养时间24h-48h，得活化培养液；摇瓶培养添加液体培养基总量0.3-0.5%的甘氨酸；2）发酵培养基刺激培养：将活化培养液按照4-6%的接种量转接至2216E发酵培养基中，在25-35℃、120-180rpm下刺激培养48-72h得到发酵培养液；所述刺激培养的过程中分批添加刺激剂，其中培养开始0-12h，向发酵培养基中加入0.5-1.0%的壳聚糖适应性发酵；培养进行到24h-36h时，向发酵培养基中继续添加刺激剂，所述刺激剂的组成和配比为：壳聚糖：酪蛋白的质量比为2:3，添加量为1.5%-2.0%；3）植物乳杆菌共育培养：将活化培养后的植物乳杆菌P8以5-8%的添加量加入到步骤2）的发酵培养液中共育培养，其中植物乳杆菌活菌数大于1×109CFUml，共育培养时间为24h，温度30-35℃，每隔6h搅拌20S，即得代谢活性提高的抗腐蚀细菌液；所述海洋假交替单胞菌为解脂假交替单胞菌Pseudoalteromonaslipolytica，采购自上海保藏生物技术中心,菌种编号:SHBCCD80739SCSIO04301；所述步骤1）中斜面培养基的组成为：蛋白胨5.0g，酵母膏1.0g，磷酸铁0.01g，琼脂20.0g，人工海水1000ml，调pH至7.4～7.8；所述步骤1）中液体培养基的组成为：蛋白胨5.0g，酵母膏1.0g，磷酸铁0.01g，人工海水1000ml，调pH至7.4～7.8；所述步骤3）中植物乳杆菌活化培养的方式为将植物乳杆菌P8菌粉经MRS培养基，在32℃～38℃下培养12～24h制备得到。

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百度查询： 上海海事大学 一种提高海洋微生物代谢活性的方法

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