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申请/专利权人：南华大学
申请日：2023-03-28
公开（公告）日：2024-06-28
公开（公告）号：CN116622810B
主分类号：C12Q1/6818
分类号：C12Q1/6818;C12Q1/6844;C12Q1/689;C12Q1/70;C12Q1/6886;C12N15/11;C12R1/35;C12R1/01;C12R1/93
优先权：["20230110 CN 2023100351064"]
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.28#授权;2023.10.24#实质审查的生效;2023.08.22#公开
摘要：本发明涉及一种新型的工程化CRISPR‑Cas14a1检测系统、方法及应用，涉及基因检测领域，Cas14a1‑sgRNA复合物体系包括Cas14a1蛋白、sgRNA及荧光探针，所述等温扩增体系包括待检测靶标序列；所述待检测靶标序列中包含能够与所述sgRNA中的靶向序列碱基互补配对的靶序列，所述靶序列的5’端上游具有PAM序列。本发明的检测系统结合等温扩增技术，通过测定荧光或胶体金侧流层析试纸条可视化检测结果，极大提高检测灵敏度约100倍和单碱基分辨能力，能以依赖PAM方式直接检测双链DNA，实现简单、快速、灵敏和特异应用于肺炎支原体、鹦鹉热嗜衣原体、乙肝病毒和肺肿瘤SNP的检测，为传染病及肿瘤单碱基突变的快速检测提供重要技术支撑。
主权项：1.一种新型的工程化CRISPR-Cas14a1检测系统，其特征在于，其包括Cas14a1-sgRNA复合物体系和等温扩增体系，所述Cas14a1-sgRNA复合物体系包括Cas14a1蛋白、sgRNA及荧光探针，所述等温扩增体系包括待检测靶标序列；所述Cas14a1蛋白为如SEQIDNO:49所示的序列，所述sgRNA为如SEQIDNO:55所示的序列以及靶向序列，所述待检测靶标序列中包含能够与所述sgRNA中的靶向序列碱基互补配对的靶序列，所述靶序列的5’端上游具有PAM序列；所述靶向序列位于SEQIDNO:55所示的序列的第100至101位之间；所述荧光探针为5’端含有荧光基团，3’端含有淬灭基团，所述荧光基团和所述淬灭基团由一段6至21T的单链DNA链接。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南华大学 一种新型的工程化CRISPR-Cas14a1检测系统、方法及应用
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