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一种基于RGO-CeO2-Au NPs构建检测GPC3的夹心型适配体传感器 

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申请/专利权人:桂林电子科技大学

摘要:一种基于RGO‑CeO2‑AuNPs构建检测GPC3的夹心型适配体传感器。一种基于氧化还原石墨烯‑氧化铈‑金纳米复合材料构建检测GPC3的夹心型电化学适配体传感器。首先制备高比表面积、优秀导电性和优秀电化学活性的RGO‑CeO2‑AuNPs。然后搭配GPC3Apt偶联为信号探针,构建形成GPC3Apt‑GPC3‑GPC3Apt的3D夹心型空间结构。最终利用DPV法记录RGO‑CeO2‑Au中CeO2的氧化电流峰值变化,实现高特异性高灵敏度检测GPC3。该传感器稳定性强、重现性好,灵敏度高,最低检测限达0.74pgmL。

主权项:1.一种基于还原性氧化石墨烯-氧化铈-金纳米复合材料RGO-CeO2-AuNPs构建检测GPC3的夹心型电化学适配体传感器,按以下步骤进行:步骤1:制备氧化还原石墨烯-氧化铈-金-GPC3适配体RGO-CeO2-Au-GPC3Apt信号探针(1)制备氧化还原石墨烯RGO:将氧化石墨烯GO溶于水中,超声破碎,得到GO溶液;向GO溶液中加入抗坏血酸,搅拌、干燥、得到RGO溶液;(2)制备氧化还原石墨烯-氧化铈纳米复合材料RGO-CeO2NPs:将六水硝酸铈和过氧化氢混合溶液中加入到尿素和柠檬酸钠溶液中,搅拌,进行水热还原反应,得到CeO2溶液;离心、洗涤、干燥;得到CeO2纳米晶体;将RGO溶液与CeO2溶液和聚乙烯吡咯烷酮混合,搅拌,干燥,得到RGO-CeO2NPs;(3)制备氧化还原石墨烯-氧化铈-金纳米复合材料RGO-CeO2-AuNPs:将氯金酸溶解在水中,加热至沸腾;搅拌加入柠檬酸钠溶液,加热至沸腾;得到Au纳米溶液;将RGO-CeO2NPs溶液与Au纳米溶液和聚乙烯吡咯烷酮混合,干燥,得到RGO-CeO2-AuNPs;(4)构建氧化还原石墨烯-氧化铈-金-GPC3适配体RGO-CeO2-Au-GPC3Apt信号探针:将RGO-CeO2-AuNPs与氨基修饰的GPC3Apt震荡混合,孵育过夜;加入牛血清白蛋白BSA溶液,进行封闭,常温孵育;离心,洗涤;去除上层游离GPC3Apt,得到RGO-CeO2-Au-GPC3Apt溶液;步骤2:电极的修饰与生物传感界面的构建(1)SPE的活化:将SPE置于稀硫酸H2SO4中,通过电化学工作站利用循环伏安法进行电极活化,清洗,干燥,得到经活化SPE;(2)制备GPC3AptSPE传感界面:将GPC3Apt滴加SPE表面,孵育,清洗,干燥;滴加BSA溶液,干燥,得到RGO-CeO2-Au-GPC3Apt;(3)构建RGO-CeO2-Au-GPC3AptGPC3AptSPE电化学适配体传感器:取RGO-CeO2-Au-GPC3Apt滴加到GPC3AptSPE表面,孵育,清洗、干燥;得到RGO-CeO2-Au-GPC3AptGPC3AptSPE电化学适配体传感器;步骤3:GPC3的工作曲线绘制(1)取标准GPC3溶液滴加到RGO-CeO2-Au-GPC3AptGPC3AptSPE电化学适配体传感器中,孵育,清洗、干燥;得到RGO-CeO2-Au-GPC3AptGPC3GPC3AptSPE工作电极;(2)取工作电极浸泡磷酸缓冲盐溶液PBs中,通过电化学工作站采用差分脉冲伏安法DPV进行扫描,记录其电流峰值;(3)对不同浓度的GPC3溶液进行检测,记录电流峰值;根据传感器的电流响应值与GPC3浓度的关系,绘制工作曲线,计算出该方法的最低检测限;步骤4:实际血清样本中GPC3的检测(1)在步骤2得到的电化学适配体传感器上,滴加待测实际血清样本,孵育、清洗、干燥、得到工作电极;(2)将工作电极放入PBs溶液中,采用电化学工作站的DPV扫描,记录其峰电流;(3)根据步骤3所述的工作曲线,计算求出所述待测实际样品中GPC3的浓度。

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