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申请/专利权人:江南大学
摘要:本发明公开了一种组成型表达人透明质酸酶的毕赤酵母及其应用。本发明在保持人透明质酸酶PH‑20核心功能序列的基础上,首先对其信号肽序列进行替换,使rhPH‑20分泌表达水平提升20%;进一步对共翻译内质网转运途径进行针对性强化,使分泌表达提升48%;之后,通过强化内质网未折叠蛋白响应使分泌表达进一步提升31%。最终,经5‑L发酵罐培养,三步改造后的重组菌OE54‑ScHAC1分泌表达rhPH‑20产量达到19.82U·mL‑1,相较出发总共提升约9.38倍,为目前酵母体系组成型表达最高水平。
主权项:1.一种组成型表达人透明质酸酶的毕赤酵母,其特征在于,所述毕赤酵母包括以下改造:过表达了人透明质酸酶、核苷酸序列如SEQIDNO.6-8任一项所示的信号识别颗粒亚基和核苷酸序列如SEQIDNO.9-11任一项所示的转录因子HAC1,所述人透明质酸酶由PGCW14启动子启动表达,且由核苷酸序列如SEQIDNO.4所示的信号肽调控表达。
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权利要求:
百度查询: 江南大学 一种组成型表达人透明质酸酶的毕赤酵母及其应用
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