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LDH-sgRNA生物偶联物介导的基因编辑方法及应用 

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申请/专利权人:海南师范大学

摘要:本发明公开了LDH‑sgRNA生物偶联物介导的基因编辑方法及应用,涉及基因编辑技术领域。包括以下步骤:建立具有Cas9蛋白表达稳定的转基因杨树和烟草的转基因株系;制备Mg‑Al‑乳酸类水滑石分层纳米片LDH,利用T7RNA聚合酶试剂盒体外合成sgRNA,然后构建LDH‑sgRNA生物偶联复合物;通过浸泡或注射方法将LDH‑sgRNA生物偶联物注入杨树和烟草的植物细胞。本发明采用上述的LDH‑sgRNA生物偶联物介导的基因编辑方法及应用,将体外合成的sgRNA通过类水滑石纳米片导入转基因株系中,简单、快速,能够进行多基因转化,实现了3‑5%的基因编辑效率,同时能够稳定遗传给后代。

主权项:1.LDH-sgRNA生物偶联物介导的基因编辑方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、建立具有Cas9蛋白表达稳定的转基因杨树和烟草的转基因株系;S2、制备Mg-Al-乳酸类水滑石分层纳米片LDH,利用T7RNA聚合酶试剂盒体外合成sgRNA,然后构建LDH-sgRNA生物偶联复合物;S3、通过浸泡或注射方法将LDH-sgRNA生物偶联物注入杨树和烟草的植物细胞;S4、通过编辑的细胞系组织培养获得再生植株,进行基因编辑效率的检测。

全文数据:

权利要求:

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